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大鼠气管内插管方法的研究进展 大鼠是广泛使用的实验动物。在许多医学实验中，气管插管必须关闭。由于大鼠呼吸频率较快、口腔狭小、声门位置较高,插管时声门暴露困难,容易造成喉痉挛、喉水肿、气管穿孔、出血和分泌物过多阻塞气管导致窒息等并发症,影响实验结果。多年来诸多学者对大鼠气管内插管的方法和插管器械做了大量的研究和改进。本文主要对大鼠气管插管时动物和气管导管的选择、麻醉方式、插管的体位和各种插管工具和方法等作一简要的综述。 1 气管插管动物 常用于实验的大鼠种类为Sprague-Daley、Wistar和Fischer大鼠,体重低于150 g的大鼠缺氧耐受性差,易在插管过程中造成缺氧死亡,一般选择体重为150~500 g大鼠为实验动物行气管插管。成年大鼠声门张开时直径约为1.5~2.5 mm,从切牙到气管隆突的距离为5.5~6.5 cm,从喉到隆突为3.5~4.0 cm,据此可采用PE190~240导管做为气管导管;更多学者使用14~18G静脉留置针做为气管导管以适应不同体重大鼠需要:一般来说,14G留置针适合300 g以上大鼠,16G留置针适合300 g以下大鼠,留置针芯前端塑型成角145°有利于导管插入,通过留置针尾翼易与上切牙固定导管位置。 2 麻醉方式的选择 啮齿类动物对急性缺氧的耐受性较低,对麻醉药所致呼吸抑制作用比较敏感,麻醉过深易造成实验动物发生呼吸抑制,如不能尽快完成气管插管极易致实验动物死亡;麻醉过浅则可能在插管过程中造成强烈应激,如肢体扭动、呼吸节律紊乱、声门关闭等,强行插管易造成口咽部水肿、声带损伤、喉痉挛、会厌或上气道出血等并发症,严重影响实验动物生理状态,干扰拔管后进食时间,影响实验结果的准确性。掌握合适的麻醉深度是成功完成气管插管的前提。 常用的麻醉方式有腹腔内注射麻醉、肌肉注射麻醉、静脉麻醉和吸入麻醉。常用的腹腔内注射麻醉方法为戊巴比妥30~50 mg/kg、美索比妥85 mg/kg或硫喷妥钠50 mg/kg腹膜后注射,氯胺酮75 mg/kg复合盐酸美托咪啶0.5 mg/kg腹膜后注射可加强镇痛作用,氯胺酮50 mg/kg复合甲苯噻嗪4 mg/kg和乙酰丙嗪1 mg/kg也可取得良好的麻醉效果。腹腔内注射麻醉起效较快,对循环呼吸影响较小,是最常用的麻醉方式,但需避免将药物注入实质性脏器所引起的药物峰浓度过高致动物死亡的情况。常用的肌肉注射麻醉方法为甲苯噻嗪8~10 mg/kg复合氯胺酮80~100 mg/kg插管前肌内注射。大鼠对麻醉药物所致呼吸抑制作用较敏感,Medd等采用1.25%美索比妥尾静脉缓慢注射,5~10 s后视大鼠反应情况追加出始量的1/3~1/2的给药方法,有效降低了呼吸抑制的发生率,在1 194次麻醉中取得了良好的麻醉效果。常用吸入麻醉剂有氟烷、安氟烷、异氟烷和七氟烷[12,13,14,15,16,17],麻醉方式为将吸入麻醉剂随氧气一起充入麻醉箱,间断观察大鼠脚趾刺激回缩反射以判断麻醉程度。吸入麻醉起效迅速并有一定的可逆性,是一种近年来使用较多的麻醉方法。吸入麻醉较其他麻醉方法的优势还在于戊巴比妥或氯胺酮可导致大鼠喉咽部分泌物增加而影响声门暴露,麻醉前10 min肌注阿托品50 mg/kg可减少分泌物的产生。 3 固定上切牙法 不同的插管方法采用不同的体位更有助于插管成功。在传统插管方法中,将大鼠仰卧放置于15~20°倾斜的平台上,并将上切牙固定在鼠板边缘,有利于显露声门。若倾斜角度超过30°,由于自身体重下坠牵拉造成膈部疼痛导致大鼠体动,易致气道拉伸扭曲,增加插管难度。在采用显微镜辅助插管中,Pena等认为采用俯卧位更易暴露声门,而Clary等采用垂直位也能清楚的暴露咽喉部结构,顺利完成气管插管。 4 管道插管方法 4.1 气管开口导丝法 在急性动物实验中,较多采用气管切开插管法。Locali等将大鼠麻醉后,做颈部中线8 mm小切口,分开筋膜后,游离甲状腺并用血管钳分开颈前肌,即可暴露白色、有环形软骨的气管。用尖刀挑开气管前面1 mm小口,顺气管方向轻轻送入导管即完成操作。Iida H等等采用气管造口导丝逆行引导插管法,其方法为大鼠麻醉后迅速切开皮肤、皮下,分离气管后做v字形切口,通过切口向口腔逆行放入导丝后,顺导丝插入导管后缝合气管及皮肤,此方法的死亡率为2%,死亡原因为出血和气管阻塞所致的窒息。气管切开插管法虽快速简便,但对动物机体创伤比较大。在慢性实验中,组织损伤及术后感染都影响大鼠机体的恢复,增加了非实验因素对实验结果的影响。 4.2 无创插管法 4.2.1 反复试插造成损害实验结果 Stark 等报道采用仰卧位盲探插管法进行大鼠气管插管的成功率可达90%,但一般需3~5 min才能完成,其中部分需反复试插3~4次,甚至6~8次,其插管成功的手感为导管通过声带进入气管时有