心梗后心电生理和左室功能变化的大鼠心电图和心脏超声心动图监测.docxVIP

心梗后心电生理和左室功能变化的大鼠心电图和心脏超声心动图监测 心血管疾病是一种危及人类生活的严重疾病。为了解决这个问题，世界各国都投入了大量的劳动力。心肌梗死动物模型的建立与应用,是研究人类心肌梗死病理、诊断及治疗的基础,对于研究人类心肌梗死的发生,发展及转归具有重要价值。因此,建立具有稳定性高,重复性强,存活时间长的大鼠心肌梗死模型对于心肌梗死的基础研究有重要的应用价值。本实验在小动物呼吸机辅助呼吸下开胸结扎冠状动脉左前降支建立大鼠心肌梗死模型,效果良好且手术成功率高,术后12周存活率较高,术后分三个时段采用ECG和UCG检测心梗后心电和左室功能变化效果良好,达到了建立高效,稳定且存活时间长的大鼠心肌梗死模型的目的。 1 材料和方法 1.1 心梗组和假手术组间的分组 健康Wistar大鼠60只,体质量200～250 g,雌雄各半,随机分为假手术组和心梗组,每组30只。均由广西医科大学实验动物中心提供【SYXK(桂)2003-0005】。 1.2 主要材料 10%的水合氯醛溶液,常用手术器械,自制的无损伤镊子和圆头金属小勺,眼科开睑器。 1.3 呼吸支持下呼吸困难的模型建设 1.3.1 麻醉前注射麻醉 心梗组大鼠称重后,用10%的水合氯醛溶液按400 mg/kg腹腔注射麻醉。将四肢固定在手术板上,手术野皮肤剪毛,碘酒、酒精消毒,铺消毒巾,连接心电图机,用标准的肢体导联进行ECG监测。 1.3.2 小动物呼吸 分离颈部正中皮肤肌肉,暴露气管,用5号注射器针头小心斜刺入气管内约1 cm,针尾紧套一柔软橡胶管与小动物呼吸机(TKR-200C小动物呼吸机,江西特力麻醉呼吸设备公司) 出气管相连,调整工作压力为0.01 MPa左右,吸呼比1∶1.5,通气频率为60次/分。 1.3.3 心梗模型的建立 参考Tang等方法,于胸骨正中偏左约1 cm,第2肋和第5肋为上下界行纵向切口,长约2 cm,切开皮肤。用弯止血钳钝性分离皮下组织及胸大肌和前锯肌交界处,在靠近胸骨缘处止血钳钝性分离第3、4 肋间隙进胸,眼科剪小心剪断第3、4肋,眼科开睑器置入切口并撑开暴露心脏。用眼科镊小心提起心包,眼科剪剪开充分暴露心脏,用自制的圆头金属小勺小心的撇开左心耳,于左心耳与肺动脉圆锥间以左冠状静脉为标识,左心耳根部下2～3 mm用6-0无创伤缝线穿过冠状动脉左前降支,进针深度约0.5 mm,结扎左冠状动脉前降支。结扎后局部心肌由鲜红变为暗紫色,外膜苍白,收缩力降低,心室膨胀,ECG显示肢体导联的QRS波峰降低,J点上移,ST段明显上抬0.2 mV即初步判定心梗模型已建立(见图1)。逐层缝合胸部切口,关胸。拔除气管内5号针头,无需缝合气管和肌肉,直接缝合气管外皮肤。术后肌注青霉素80万单位三天预防感染。假手术组开胸后冠状动脉左前降支下穿过缝合线,但不结扎。 1.4 ecg检测心电生理 术后10 min,4、8和12周在上述麻醉方法下麻醉大鼠,四肢皮下插入针电极,描记标准的肢体导联ECG,电极位置参照人的相应部位。 1.5 左室代位设计 术后4、8和12周在上述麻醉方法下麻醉大鼠,采用彩色多普勒超声心动图仪(美国惠普公司5500型)检测左室舒张末期内径(LVIDd),左室收缩末期内径(LVIDs),左室射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS)。所有超声测值均取3个心动周期的平均值。 1.6 心肌组织结构观察 术后12周将大鼠断颈取出心脏,用4℃生理盐水冲洗血液,用滤纸吸去水份后剪除血管组织、左右心房及右心室,在左心室冠状面梗死区中部,切取厚约2～3 mm环状心肌组织块,中性福尔马林固定,石蜡包埋切片,切片厚度3～4 μm,苏木素-伊红染色(HE染色)后显微镜下观察心肌组织结构。 2 结果 2.1 两组大鼠术后情况 两组大鼠在术后即刻恢复自主呼吸并脱离呼吸机,于术后2～4h恢复清醒,心梗组恢复较慢。心梗组30只大鼠,术中因不小心钩中肺动脉死亡1只,术后24 h因呼吸功能恢复差死亡2只,因急性心力衰竭死亡2只,术后72 h共有25只大鼠存活,存活率为83.3%;术后12周因慢性心力衰竭死亡3只,存活12周以上大鼠共22只,存活率为73.3%。假手术组15只大鼠,术中因不小心钩中肺动脉死亡1只,术后24 h因呼吸功能恢复差死亡1只,术后72 h共有13只大鼠存活,存活率为86.6%;术后12周无一例死亡。 两组大鼠术后10 min行ECG示,假手术组Ⅰ、Ⅱ导联R波振幅降低,S-T段升高但不超过0.2 mV;心梗组Ⅰ、Ⅱ、avL导联R波振幅降低,J点上移,S-T段呈弓背向上升高超过0.2 mV(图1)。 2.2 ecg与velp型导联的s-t段 假手术组术后4、8和12周与术前的ECG相比无特殊改变。心梗组术后4周ECG示Ⅰ和avL导联呈QS型,升高的S-T段基本回落