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珍稀植物组织培养研究进展 稀土濒危植物具有结构紧凑、年生长期长、植株大、年大事等特点。此外，动物饲料不足、地表种子和地下种子腐烂、遗传特性，导致珍稀种子的自然繁殖能力弱、种群数量增加等。苗木遗传不稳定，苗木不协调，生产力低。实苗育苗远不能满足市场需求。 利用组织培养方法对珍稀植物进行快繁研究,不仅可以克服种子繁殖中存在的诸多问题,而且可以克服常规无性繁殖速度慢、繁殖率低的缺点.加上组织培养不受季节、气候等因素的制约,节省土地,速度快,质量高,技术密集,便于集约化管理和工厂化生产的优点因此将植物组织培养技术应用于珍稀植物的快速繁殖,对保护珍稀树种的种质资源,丰富园林植物多样性,缓解国内优质木材和园林绿化植物供应紧张的状况,都具有重要的理论意义和实际应用价值.本文拟从珍稀植物组织培养外植体的选择和分化途径上、基本培养基、激素及附加营养成分的使用等方面来探讨组织培养技术在珍稀植物中的研究现状和实际应用中存在的问题. 1 实施了大量保护植物,并使其应用和培养植物不足或处于起步阶段,且逐渐处于起步阶段和20 由于生态环境的恶化,许多动植物的生存受到严重的威胁,许多物种已濒临灭绝的危险.我国国家环境保护局和中国科学院植物研究所于1987年编写了中国珍稀濒危保护植物名录植物第一册),公布了8种国家一级保护植物,159种二级保护植物. 珍稀植物大多生境范围狭窄,大多生长在深山老林,与世隔绝,因此其应用和研究价值很容易被忽视,目前多数还停留在资源调查和就地保护的初级阶段.由于缺乏技术支持,加上资源稀少,其应用受到极大限制,也导致人们对它们的研究热情不高.在8种国家一级保护植物和159种二级保护植物中,目前仅有4种一级保护植物和19种二级保护植物有组织培养成功的报道(表1).在这些研究中,人参的体细胞胚培养和细胞培养技术都趋于成熟.但更多的尚处于起步阶段. 2 植物细胞分类及体或体种类和分化途径 表2列出了濒危植物组织培养的外植体种类和分化途径,由表2可以发现,濒危植物组织培养的分化途径也有器官发生途径和体细胞胚发生途径等两种. 2.1 关于器官的起源 2.1.1 和平台植株的分离和诱导 以芽或带芽茎段为外植体直接诱导芽的萌发获得再生植株的珍稀植物有珙桐、金花茶、银杏、金铁锁、核桃、巴东木莲、伞花木、野生荔枝、云南山茶花和香果树. 蕨类植物桫椤和鹿角蕨采用孢子、幼孢子体为外植体,通过孢子繁殖途径形成再生植株.桫椤的孢子经过数月培养形成原叶体,精子器中的精子借助原叶体腹部的自由水,到达颈卵器,与卵结合发育成胚,而后萌发形成小苗.桫椤还可以通过无配子繁殖途径产生再生苗,将小原叶体切割下来培养,约60 d长出不定胚,又经过约30 d培养得到正常的无性孢子体苗或丛苗 鹿角蕨幼孢子体培养4周后产生与兰花原球茎相似的绿色球状体(GGB),这种GGB原球茎可以继代获得大量的原球茎,又可再诱导GGB长出丛生苗. 2.1.2 诱导愈伤组织再生植株 (1)以茎段或叶为外植体.以茎段或叶为外植体通过诱导愈伤组织,再诱导芽的再生途径的植物有人参、银杏、半日花、翅果油树和香果树等. 目前,海南粗榧、白豆杉的组织培养只是以提取次生代谢产物为目的,因此只要求诱导出愈伤组织,而未得到再生植株,两者均以嫩茎嫩叶为外植体成功诱导出愈伤组织.杜仲组织培养的研究较为成熟不仅以胚轴为外植体通过诱导愈伤组织途径获得了完整的再生植株,而且以子叶、胚轴、茎、叶为外植体,诱导出适于悬浮培养的愈伤组织,为提取有效药用成分和杜仲胶奠定了基础. (2)以种子胚、子叶为外植体.金花茶以胚为外植体,先长根再抽出新芽;以子叶为外植体,同时诱导出不定芽和假珠芽,假珠芽具有很强的分生能力,利用假珠芽,又可诱导产生胚状体、不定芽和假珠芽.银杏、裸果木、半日花、翅果油树、杜仲、疣粒野生稻、普通野生稻、伞花木、四合木等都可以种子胚轴或子叶为外植体,通过诱导愈伤组织途径形成再生植株. (3)以孢子为外植体.蕨类植物桫椤的孢子经过数月培养形成原叶体,原叶体在细胞分裂素与生长素为10∶1的培养基上培养,形成长丝状体构成空心的半圆形愈伤组织团,约经3个月在绿色丝团上长出幼孢子体或仅长根;在高盐浓度的培养基上补加高剂量的生长素,培养的原叶体形成坚实致密的实心愈伤组织团块,由褐色愈伤组织相间少量再生绿色原叶体,在愈伤组织的凹陷处产生单个或丛状黄绿色球形不定胚,进而发育为不定苗. 2.2 细胞胚的产生 植物体细胞胚胎发生(somatic embryogenesis)是指单倍体或双倍体的体细胞在特定条件下,未经性细胞融合而通过与合子胚胎发生类似的途径发育出新个体的形态发生过程. 以人参胚为外植体,通过间接、直接发生途径均产生了体细胞胚.以半日花的叶为外植体,通过间接发生途径产生了体细胞胚.何丽君等以四合木子叶、胚轴和根为外植体,通