外源海藻糖对烟草幼苗生长及抗旱性的影响.docxVIP

外源海藻糖对烟草幼苗生长及抗旱性的影响 草本是我国的一个重要作物。自2008年以来，种植面积约为113.33万公顷，种植面积和产量为世界第一。近年来,烟草生产常因季节性干旱导致烟叶产量降低,上中等烟比例减少,叶内还原糖含量下降,总氮和烟碱含量升高,内在化学成分比例失调;在干早胁迫下烟叶中主要香气物质含量减少,香气质量变差。因此,研究烟草的抗旱保苗稳产技术具有重要的现实意义和应用价值。 海藻糖(Trehalose,TH)是由2个葡萄糖分子通过α,α-1,1糖苷键连接形成的非还原性双糖,最初由Wiggers等于1882年从黑麦麦角菌中分离出来。海藻糖不仅具备低聚糖的一般特性,而且它对生物体和生物大分子具有独特的非特异性保护作用,能提高生物体对各种逆境胁迫的抗性。相比转基因等方法而言,利用外源物质提高烟草抗逆性不失为一种有效途径,这已在油菜、黄瓜等作物上得到较好的应用。笔者研究了外源海藻糖对模拟干旱胁迫下烟草幼苗抗旱性的作用效果。 1 材料和方法 1.1 材料表面 供试烟草品种K326由中国烟草育种研究(南方)中心提供。 1.2 方法 1.2.1 种子漂浮育苗 材料的培养:烟草种子温烫浸种(55 ℃,10~15 min),室温浸种催芽5~6 h后,放在铺有10层湿润滤纸的培养皿上,置于光照培养箱内培养,昼夜温度为28 ℃/16 ℃,湿度为60%,每天光照12 h。待种子露白后播种到漂盘上,每穴1粒,每处理50粒,重复3次。按照漂浮育苗方法统一管理。 外源海藻糖处理:播种后,在营养液中分别一次性添加0、5、10、15 mmol/L海藻糖作为不同的处理,依次编号为处理a、b、c、d,处理14 d。 PEG6000模拟干旱处理:待烟草幼苗长至5叶1心期,向上述4个营养液中分别加入10%PEG6000进行干旱胁迫培养,以未添加外源海藻糖及未进行PEG6000模拟干旱的烟苗为对照CK1,其余编号同上。10 d后测定相关生理指标。 1.2.2 叶片叶绿素含量与膜透性测定 烟草幼苗叶片相对含水量(RWC)采用差减法计算,其计算方法如下:取待测的叶片称其鲜重(FW),后置于105 ℃的烤箱内杀青30 min,于80 ℃烘干24 h,称其干重(DW)。RWC=(FW-DW)/FW×100%。叶绿素含量测定采用比色法;叶片细胞质膜透性测定采用电导率法;脂质过氧化程度分别测定叶片及根系内的丙二醛(MAD)含量, 及POD、 CAT、SOD活性。 1.2.3 数据的统计和分析 数据相关性分析采用统计软件SPSS 17.0进行。 2 结果与分析 2.1 干旱胁迫对烟草幼苗生长指标的影响 从图1可以看出,对照和模拟干旱胁迫处理的RWC差异显著。经方差分析,对照和处理在0.01水平上差异显著,说明在用10% PEG6000处理10 d后,烟草幼苗均受到了干旱胁迫。在干旱胁迫下,前期营养液中添加5、10、15 mmol/L海藻糖的3个处理即处理b、c和d的RWC均比处理a高,分别提高19.41%、28.13%和30.22%。经方差分析,a与b、c、d差异显著(α=0.01)。说明海藻糖可提高干旱胁迫下叶片的保水能力,考虑应用成本,以10 mmol/L海藻糖的处理效果最好。 2.2 对干旱胁迫下烟草幼苗的影响 从图2可以看出,处理a烟草幼苗叶片中叶绿素含量显著低于对照CK1。经方差分析,处理a和CK1在0.01水平上差异显著,说明在用10%PEG6000处理10 d后,烟草幼苗受到了干旱胁迫。添加海藻糖的处理b、c和d的叶绿素含量则明显高于处理a,方差分析在0.01水平上差异显著。 2.3 海藻糖对烟草幼苗干旱胁迫及幼苗电导率的影响 从图3可知,处理a的叶片电导率为49.21%,比CK1的电导率(17.15%)增加了32.06个百分点。经方差分析,处理a和CK1在0.01水平上差异显著,说明在用10%PEG6000处理10 d后,烟草幼苗受到了干旱胁迫。烟草幼苗在干旱胁迫下,前期营养液添加海藻糖的处理b、c和d的电导率分别为34.22%、28.36%和25.73%,比处理a的49.21%分别低14.99、20.85和23.48个百分点。经方差分析,处理a与处理b、c和d在0.01水平上差异显著,说明海藻糖可缓解干旱胁迫对烟草幼苗质膜透性的影响,处理c和d的效果要好于处理b。 2.4 海藻糖对干旱胁迫下叶片和根系生长指标的影响 从图4知,处理a的烟叶及根系的MDA含量要比正常生长状态下的CK1的MDA含量增加了37.53 nmol/g。经方差分析,处理a和CK1在0.01水平上差异显著。在干旱胁迫下,前期营养液中添加海藻糖的处理b、c和d的叶片中MDA含量比处理a分别降低27.43、33.41和35.53 nmol/g,根系中MDA含量比处理a分别降低8.50、10