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浅谈新生代的亲属因子 1987年，laskey通过对两组蛋白素和dna的外部生理强度进行实验时发现，需要在内核中含有一些酸性蛋白质，这些物质可以转化为核小型体。否则，就会沉淀，提出了最初的分子伴侣概念。后来,Ellis在研究高等植物叶绿体中的核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)时也发现类似现象,即在叶绿体中合成的8个大亚基以及在细胞质中合成的8个小亚基,都必须先和一种蛋白结合后,才能在叶绿体内组装成活性酶分子。因此提出在普遍意义上帮助新生肽链折叠的分子伴侣概念。1993年Ellis对分子伴侣的定义是:分子伴侣是一类相互之间有关系的蛋白,它们的功能是介导蛋白质正确的折叠与装配,但并不构成被介导的蛋白质的组成部分。现今这个概念已得到了补充和发展。 1 分子落实论co-so的结构与功能 目前认为,分子伴侣(molecular chaperone)是指能够结合和稳定另外一种蛋白质的不稳定构象,并能通过有控制的结合和释放,促进新生多肽链的折叠、修饰、装配、以及错误多肽链的降解。应该指出的是,分子伴侣是从功能上定义的,凡具有这种功能的蛋白质都是分子伴侣,它们的结构可以完全不同。 这一概念目前已延伸到许多蛋白质,现已鉴定出来的分子伴侣主要属于几类高度保守的蛋白质家族,其成员广泛分布于原核及真核细胞中。其中大部分成员属于热体克蛋白(heat shock protein,Hsp),根据其结构与功能的差异,分子伴侣包括几个结构上不相关的蛋白质家族: Hsp100 、Hsp90 、Hsp70 、Hsp 60 、Small Hsps (sm Hsp) 、钙联接蛋白(Calnexin)、TCP-1环复合体(TCP-1 containing ring complex,TRiC)、核浆素(Nucleoplasmin)、辅助分子伴侣Co-chaperone (DnaJ 、GroES、Cpn10)和折叠酶等。其中研究比较清楚的是Hsp70/ DnaK 和Hsp60/GroE 系统,尤其对后者即伴侣因子的研究进展较快,已在Cell,Nature等重要杂志先后报道,本文综述如下。 2 真核生物中的小体糖1,5-二磷酸羧化酶抑制剂清髓工酶的结构及分布 伴侣因子是一种普遍存在的蛋白质家族,一般结构是由两个圆环背靠背组成的一个大圆柱体,每个圆环是由具有ATP酶活性的分子量约60 kD的亚基构成。圆柱体中央的空腔是蛋白质折叠的重要场所,它提供了底物蛋白折叠所需的封闭环境,参与协助其它蛋白质多肽的折叠修饰等。 根据伴侣因子来源及同源性的特点可将其分为两大组:第一组(Group I)伴侣因子存在于细菌及真核生物中的内生同源细胞器(线粒体和叶绿素),成员包括细菌内的GroEL、真核生物线粒体中的Hsp60(Cpn60)以及叶绿体中的核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶结合蛋白(Rubisco Bonding Protein)。第二组(Group II)伴侣因子存在于古细菌及真核生物的胞质中,成员有古细菌胞质内的温度传感器(Thermosome)和嗜热因子55(thermophilic factor 55,TF55),以及真核生物胞质内的含有TCP-1的伴侣因子(chaperonin containing TCP-1,CCT), 也称为TCP-1环复合体(TCP-1 containing ring complex,TRiC)。 2.1 第一组离婚因素 这一组伴侣因子中尤以对大肠杆菌中的GroEL的结构、功能研究较为详细,促进了人们对伴侣因子的认识和了解。 2.1.1 groel亚单元的结构及其与合成肽的关系 早在1978年,Georgopoulos等学者研究发现,大肠杆菌中的λ噬菌体生长时,必须有GroE的存在,GroE系统是由GroEL及其它的辅助分子伴侣GroES组成。 GroEL蛋白是同型寡聚复合物,由14个相对分子量为57 kD的亚基组成;GroES是由相对分子量为10 kD的亚基组成的七聚体环,连在GroEL的末端。 GroEL的电镜图像显示其圆柱体状的颗粒中有一个中央腔,腔内可以被底物多肽占据。Braig等用X-ray结构分析得到了GroEL更加清晰的图像,证实GroEL分子类似一个直径137 ,高146 的圆筒(?=10-10m),它的14个亚基背靠背构成两个圆环,两个圆环围绕形成两个独立的宽45 空腔,此空腔作为多肽底物折叠的空间。每个GroEL亚单元可以被分成3个不同的区域:(1) 赤道结构域(equatorial domain),由第6～133和409～523氨基酸残基构成,它组成圆筒的中央部分且主要为α螺旋,具有调节所有中间接触及大部分内部接触的作用。同时还含有面向中央腔的ATP结合位点。(2) 顶端结构域(apical region), 由