胎盘型谷胱甘肽s转移酶的表达与胃黏膜肠化生增殖状态分型的关系.docxVIP

胎盘型谷胱甘肽s转移酶的表达与胃黏膜肠化生增殖状态分型的关系 由于谷胱甘醇s受体（gst）的存在，它与人体的健康和疾病有关，尤其是胎盘型谷胱甘醇s受体（gst-）。我们采用免疫组织化学方法检测各类胃黏膜病变中GST-π的表达,探讨GST-π的表达与胃黏膜肠化生及其增殖状态分型、硫酸黏液分泌状况的关系。 1 材料和方法 1.1 病例选择及诊断 选取我院1992～1997年间胃黏膜活检组织标本142例及外科手术标本25例。全部标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片4μm厚。经常规HE染色,按全国胃癌协作组的诊断标准分组:慢性浅表性胃炎15例;伴肠化生慢性萎缩性胃炎112例;伴异型增生慢性萎缩性胃炎20例;胃腺癌20例。 1.2 免疫组化染色 1.2.1 全部病例采用免疫组织化学(S-P)方法染色,单克隆抗GST-π抗体和S-P试剂盒均购自福州迈新公司(即用型)。抗体标记前切片经微波处理,修复暴露抗原。以已知阳性切片作阳性对照,以TBS代替一抗作空白对照。严格按照S-P试剂盒说明书操作,DAB显色。结果判断:免疫组化染色阳性信号为棕黄色,采用显微摄像计算机图像分析系统,每张切片检测5个视野(×400),判别标准参照文献,即阴性为阳性细胞5%腺上皮细胞或肿瘤细胞;阳性为阳性细胞5%腺上皮细胞或肿瘤细胞。 1.2.2 伴肠化生慢性萎缩性胃炎病例作免疫组化与黏液组化套染。即用型单克隆抗增殖细胞核抗原(PCNA)抗体和S-P试剂盒均购自福州迈新公司,黏液组化染液由本实验室自制。计算PCNA阳性细胞数以及腺上皮细胞或肿瘤细胞总数(每例≥200个),求出细胞增殖指数(PI)。PI=PCNA阳性细胞数/腺上皮细胞或肿瘤细胞总数×100%。按我科建立的标准进行肠化生增殖状态分型:高增殖状态型(HPT)PI≥40,中增殖状态型(MPT)20≤PI40,低增殖状态型(LPT)PI20。 1.2.3 实验数据的统计学处理采用χ2检验。 2 免疫组化检测 2.1 GST-π阳性于细胞浆中表达,167例各类胃黏膜病变中GST-π阳性表达76例,阳性率为45.5%。各类胃黏膜病变中GST-π的表达情况见表1。伴肠化生慢性萎缩性胃炎GST-π的阳性率显著高于慢性浅表性胃炎(χ2=4.089,P0.05);伴异型增生慢性萎缩性胃炎GST-π的阳性率慢性浅表性胃炎相比差异极显著(χ2=11.091,P0.01);伴异型增生慢性萎缩性胃炎GST-π的阳性率显著高于伴肠化生慢性萎缩性胃炎(χ2=6.105,P0.05)。 2.2 免疫组化与黏液组化套染显示PCNA阳性位于细胞核,硫酸化黏液蓝色。伴肠化生慢性萎缩性胃炎GST-π的表达情况见表2。高增殖型肠化生GST-π的阳性率显著高于中增殖型肠化生(χ2=4.514,P0.05)及低增殖型肠化生(χ2=6.579,P0.05)。硫酸化黏液阳性肠化生中GST-π的阳性率与硫酸化黏液阴性肠化生比较,差异不显著(χ2=3.711,P0.05)。 3 胃黏膜肠化生的临床意义 GST-π分子量为24.5ku,主要分布于胎盘、肝脏、肺、肾和红细胞,与组织的分化发育有关,在胎肝和胎胃黏膜中水平较高,在正常成年人和动物的组织中表达较低。然而,在许多肿瘤细胞和细胞癌变过程中GST-π的表达会异常升高,特别在一些化学致癌剂诱发的动物癌前病变过程中,GST-π表达异常升高,被认为是一个典型的癌前病变标志酶,是检测癌变“启动细胞”最灵敏的标志酶。齐春会等发现,肠化生尤其是不典型增生的胃组织GST-π表达的阳性率显著高于正常胃黏膜。本组实验结果显示,胃腺癌、伴异型增生慢性萎缩性胃炎和伴肠化生慢性萎缩性胃炎GST-π的阳性率均显著高于慢性浅表性胃炎,但伴异型增生慢性萎缩性胃炎与胃腺癌GST-π的阳性率无明显差异,提示GST-π是一种较好的胃癌前病变标志物。 虽然慢性胃炎—胃黏膜萎缩—肠化生—异型增生—胃癌这一模式已为国内外多数学者所接受,但文献报告随访1～10年的肠化生癌变率仅为1.9%。目前仍有学者认为肠化生是机体对内外环境各种有害因子的应答反应,肠化生黏液成分的不同可能是上皮细胞在有害因子刺激下为适应环境而致黏液分泌功能和形态转变的结果。因此,胃黏膜肠化生根据黏液成分探讨与胃癌的关系有一定的局限性。 胃黏膜肠化生只有少部分发展为癌,如何区分并早期发现这些高危人群,对胃癌的早期诊断具有重要意义。细胞癌变最突出的特征是异常增殖,胃黏膜肠化生细胞增殖状态分型是评价胃癌发生风险的一项有效指标。高增殖型肠化生细胞基因表达异常、异倍体细胞的百分率和幽门螺杆菌的感染率较高,且细胞分化不良,更具胃癌前病变的特征。本组实验显示GST-π的阳性率与肠化生细胞是否分泌硫酸黏液无关;高增殖型肠化生中GST-π的阳性率显著高于中、低增殖型肠化生,提示胃黏膜肠化