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痰涂片afb镜检方法与现存问题 严重的慢性疾病是人类健康的严重危害。1993年,WHO(世界卫生组织)宣布“全球结核病处于紧急状态”,把结核病列为重点控制的传染病之一。1998年,WHO再次指出“遏制结核病行动刻不容缓”。痰涂片AFB(抗酸杆菌)镜检对于发现传染源、确定诊断和制定化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义,在现代结核病控制工作中起着重要作用。笔者近来一直从事痰涂片AFB镜检工作,深感实际操作中的复杂和艰辛。现将痰涂片AFB镜检方法与现存问题进行分析和探讨。 1 确认收集点的现状 1.1 基本情况 1.1.1 痰涂片iib的检查方法 痰标本的验收→玻片制备→制备涂片→萋尼氏染色→镜检→发出报告 1.1.2 生物危害因子 AFB是引起人和动物结核病的致病菌,经呼吸道、消化道、皮肤粘膜的损伤处等侵入易感机体,属生物危害因子。因其含有大量类脂质,抵抗力较强,尤其对于干燥抵抗力特别强,在干燥的痰内可存活6～8个月,若附着在尘土上,飞扬在空气中可保持传染性8～10 d,所以痰盒和废弃标本等污染物,均须经高压蒸汽灭菌后才能丢弃或清洗,或置入焚烧炉内彻底焚烧,以杜绝传染的发生和蔓延。 1.2 存在的问题 1.2.1 查痰点的工作 痰涂片AFB镜检是一项既繁锁、辛苦,危害性又大的工作,加热染色过程中还会产生有害的异味气体。国家规定每个查痰点必需由2名或2名以上的专职工作人员担任,一来共同商讨、辩别、解决疑难问题,二来能够在单位时间内保质保量地完成工作。赤壁市有2个乡镇卫生院、市人民医院与市疾控中心结防门诊设有查痰点,目前除市人民医院查痰点是由专职工作人员担任外,其余均是兼职,符合率仅达25%。每天当班的1名工作人员,除了查痰工作外,还同时得负责血液的采集、肝功能、乙肝三系、结核抗体、血沉、血常规、尿常规、甚至狂犬病毒抗体等的检测工作,且不说其中会造成的交叉感染,单是时间上就安排不过来,要想在单位时间内保质保量地完成工作,不出现高假阳性与高假阴性,低假阳性与低假阴性的发生,难度似乎有点大。我国是全球22个结核病高负担国家之一。据2000年全国结核病流行病学抽样调查显示,我国农村活动性肺结核患病率和涂阳肺结核病患病率分别为393/10万和130/10万,比城市的211/10万和78/10万分别高近1.0倍和0.7倍,说明来自农村的结核病人占多数,他们希望及时得到结果报告单,否则会因长时间等待造成恶劣情绪。 1.2.2 环境发生的危险因子 实验室防护的目的是为工作人员提供安全操作某种病原体所需要的最低防护条件。《病原微生物实验室生物安全管理条例》第三章第二十一条,一级、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动,应当具备下列条件:生物安全柜、适当的呼吸保护装置,HEPA(高效颗粒空气)过滤器,有密闭转头的离心机以及个人防护设施(手套、实验室工作服、面具等),为防止环境污染,须有洗手水池和高压灭菌器,加盖的生物危害废物桶以及严格的实验室准入控制等。前面已经谈到过,AFB是一种生物危险因子,在打开痰盒盖和涂片过程中,都会有气溶胶的产生,引起传播,造成感染的发生。笔者调查了上面所提4个查痰点的防护措施,合格率基本上为0。据实验室感染的相关报道,不到20%的病例与已报告的事故有关,80%的病例似乎与感染性气溶胶有关,1976年Harrington和Shannon的调查表明,在英国医学实验室的工作人员结核病的危险比普通人群高5倍,在英国肝炎和志贺菌病也继续认为是职业性危险,同结核病一起构成第三大最常见、与职业有关的传染病。 1.2.3 显微镜调节部分 为了提高阅片效率,缩短阅片时间,适度的调节眼睛,国家明文规定用于阅片的显微镜必须为双目显微镜,另有几台备用。而笔者现用的仍是陈旧的单目显微镜独立桌面。 1.2.4 痰标本的容器和留痰 根据WHO和国际防痨及肺部疾病联合会针对低收入是结核病疫情严重的发展中国家所制定的技术指南,痰涂片AFB镜检是相应国家开展结核病控制项目时,最符合成本—效益原则的细菌学实验室技术。它具有诊断性强(比X线),AFB镜检方法技术相对简单,容易标准化和完成操作等优势。初诊病人应送3份痰标本(夜间痰、清晨痰、即时痰),痰标本的容器,应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶或采用直径4 cm、高2 cm的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上应注明病人姓名、编号(初诊门诊序号或随访病人登记号)、检查项目和容器序号1(即时痰)、2(夜间痰)、3(清晨痰)及日期。留痰时应嘱咐病人深呼吸后,由肺部深处咳出的分泌物3～5ml。留取痰标本后,痰盒切勿倒置、严防痰液外溢。根据痰标本的性状可分为干酪痰、血痰、粘液痰为合格痰标本,AFB检出率较高,唾液多为不合格痰标本,检出率很低,要求重新送检。笔者