升麻、桂枝、甘草、黄芩与石膏配伍对有效成分煎出量的影响.docxVIP

升麻、桂枝、甘草、黄芩与石膏配伍对有效成分煎出量的影响 四气是四种不同的药物，包括热和热的四种，也被称为四气。这反映了药物在人体阴阳变化中的作用趋势。这是药物作用理论的重要组成部分，也是解释药物作用的主要理论依据之一。药性的寒热温凉是由药物作用于人体所产生的不同反应和所获得的不同疗效而总结出来的, 它与治疗疾病的性质是相对而言的。而药物对人体产生的作用来源于药物本身有效成分, 有效成分就是四气表现的物质基础。寒凉药与寒性药配伍使用, 增强药效;温热药与寒性药配伍, 相互制约。本实验在已有文献的基础上利用高效液相色谱法, 以药物有效成分含量为指标, 测定了寒性药石膏与寒性药黄芩, 凉性药升麻, 热性药桂枝, 温性药甘草配伍后各药有效成分煎出量的变化, 为药性理论进行物质基础上的验证。 1 试剂和仪器 Agilent-1100型高效液相色谱仪 (美国Agilent) , 配置四元梯度泵、在线脱气机、VWD检测器; AS3120A超声提取器 (天津奥特赛恩斯仪器有限公司) ;2140型电子分析天平 (上海奥豪斯公司) ; AB135-S十万分之一电子天平 (瑞士METTLER) ; U-3010型紫外-可见分光光度计 (日立公司) 。 对照品咖啡酸 (批号:110885-200102) 、阿魏酸 (批号:0773-9910) 、异阿魏酸 (批号:111698-200602) 、肉桂酸 (批号:120796-201217) 、肉桂醛 (批号:120758-201213) 、甘草酸 (批号:0756-200009) 、 甘草苷 (批号:111610-200604) 、黄芩苷 (批号: 110715-200413) , 均来自上海永恒生物科技有限公司, 纯度为98%。甲醇为色谱纯, 水为重蒸馏水, 其他试剂均为分析纯。升麻、桂枝、甘草、黄芩饮片经辽宁中医药大学李峰教授鉴定为毛茛科植物升麻 (Cimicifuga foetida L.) 的干燥根、茎樟科植物肉桂 (Cinnamomum cassia Presl) 的干燥嫩枝、豆科植物甘草 (Glycyrrhiza inflata) 的干燥根、黄芩 (Scutellaria baicalensis Georgi) 的干燥根。 药对提取物自制[取饮片, 按比例 (桂枝∶石膏=1∶3, 升麻∶石膏=1∶3, 甘草∶石膏=1∶5, 黄芩∶石膏=1∶5) 称定, 置圆底烧瓶中, 加水回流提取, 滤过, 合并滤液, 蒸干, 于70 ℃减压干燥, 粉碎成细粉, 即得]。同法制备各单味药提取物。 2 色谱条件及色谱条件 甘草酸和甘草苷的含量测定采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm, 5 μm) 色谱柱, 其他成分含量测定采用Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm × 4.6 mm , 5 μm) 色谱柱, 流速: 1.0 mL·minuf02d1, 进样量:20 μL, 其他色谱条件见表1。升麻石膏药对供试品、混合对照品、单升麻供试品HPLC图见图1, 桂枝石膏药对供试品、混合对照品、单桂枝供试品HPLC图见图2, 甘草石膏药对供试品、混合对照品、单甘草供试品HPLC图见图3, 黄芩石膏药对供试品、混合对照品、单甘草供试品色谱图见图4。 2.2 对照品溶液的制备 2.2.1 对照品储备液的制备 精密称取8个对照品咖啡酸、阿魏酸酸、异阿魏酸、肉桂酸、肉桂醛、甘草苷、甘草酸、黄芩苷适量, 分别加甲醇配制成含咖啡酸0.175 6 mg·mLuf02d1、阿魏酸0.061 8 mg·mLuf02d1、异阿魏酸0.202 8 mg·mLuf02d1、肉桂酸1.113 mg·mLuf02d1、肉桂醛1.058 mg·mLuf02d1、甘草苷0.433 6 mg·mLuf02d1、甘草酸0.382 0 mg·mLuf02d1、黄芩苷0.982 mg·mLuf02d1的对照品储备溶液。 2.2.2 混合对照品溶液的制备 精密吸取“2.2.1”项下的对照品储备液适量, 用甲醇稀释, 制成每1 mL含咖啡酸、阿魏酸、异阿魏酸分别为7.024, 3.635, 67.60 μg的升麻石膏药对混合对照品溶液; 分别含肉桂酸、肉桂醛17.63, 37.10 μg的桂枝石膏药对对照品混合溶液;含甘草苷、甘草酸分别为144.5, 254.7 μg的甘草石膏药对对照品混合溶液;含黄芩苷392.8 μg的黄芩石膏药对对照品溶液, 即得。 2.2.3 供试品溶液的制备 分别取升麻石膏药对、升麻, 甘草石膏药对、甘草提取物各0.5 g, 精密称定, 置50 mL锥形瓶中, 加10%乙醇25 mL; 桂枝、石膏药对提取物0.5 g, 单桂枝提取物0.1 g, 精密称定, 分别置50