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马兰草抗炎活性与抗炎活性的相关性研究 马兰草是科科兰科植物的带根整草。这是贵州特色的苗族药品。这种草可以服药。具有清热解毒、祛瘀、止血、消积等功效。这是各种复合汤剂的重要原料。它的主要化学成分包括：一类、毛囊、第三类、黄酮等化合物。中药指纹图谱作为一种重要的定性定量分析方法,在评价药材的化学成分及其含量差异上得到广泛应用。然而,中药作为一个多组分、多靶点综合作用的复杂整体,其药效的体现与指纹图谱中化学指标成分的体现并不是完全一致的,因此仅仅研究药材的化学指纹图谱是远远不够的。只有将中药指纹图谱中化学成分的变化跟中药药效结果联系起来建立起有实际意义的中药谱-效关系,才能为中药的质量控制和药效评价标准提供规律性的科学依据 。因此,本实验根据贵州民族药材马兰草的功效,选择其抗炎作用作为药效指标,对马兰草的指纹图谱和抗炎作用的关系进行初步探讨,阐明其抗炎作用的药用物质基础。 1 仪器和试剂盒 1.1 仪器和设备 高效液相色谱仪(Agilent 1260,DAD检测器),KQ-250B型超声波清洁器(昆山市超声仪器有限公司);HH-S4型电热恒温水浴锅(金坛市文华仪器有限公司);电子分析天平(AL205型,梅特勒-托利多),乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试剂为分析纯。 1.2 s,ir、uv鉴定 原儿茶酸、丁香酸、阿魏酸、臭矢菜素D(本实验室自制,经NMR、MS、IR、UV鉴定其结构,纯度均达98%以上,可供含量测定用)。阿司匹林(石家庄康力药业有限公司,批号:110418)。马兰草药材采自贵州贵阳,原植物经贵阳中医学院何顺志研究员鉴定为马兰全草。 1.3 实验动物 昆明种小鼠,体重(20±2) g,♀♂兼用(长沙市开福区东创实验动物科技服务部,合格证号HNACSD。 2 方法和结果 2.1 验选部位：乙醇提取部位 课题组前期研究发现,乙醇提取部位为马兰草抗炎活性部位,因此,本实验选取乙醇提取部位进行相关研究。将马兰草药材干燥、粉碎,称取400 g,置于5 000 mL的圆底烧瓶中,加入8倍量体积分数80%乙醇回流提取3次,每次2 h,提取后滤过、浓缩、干燥,浸膏备用。 2.2 马兰草醇提取物对小鼠耳水肿度、抑制率的影响 选取18~22 g小鼠80只,♀♂各半,随机分8组,每组10只。第1组给蒸馏水,第2~7组给马兰草不同剂量乙醇提取物;第8组给阳性药。按体重每10 g 0.2 mL灌胃给药每天1次,连续给药7 d,末次给药45 min后,于小鼠右耳两面涂二甲苯每只20 μL,左耳不涂为正常耳。15 min后将左、右两耳片切下,以8 mm打孔器取下左、右耳片,立即用电子天平称重(mg),计算左右耳肿胀度、抑制率,结果见表1。 马兰草乙醇提取物不同剂量组均有一定抗炎活性,抑制率在11.08%~48.66%之间,其中,50.95 mg·kg-1组抗炎活性与阳性对照组相当。以马兰草乙醇提取物的质量浓度对和抗炎活性进行线性回归,相关系数r=0.951 1,说明线性相关程度较高,马兰草乙醇提取物抗炎活性随着给药剂量的增加呈正相关性。 2.3 马兰草活动人士的谱谱测试和谱峰索引测量 2.3.1 n/wmim检测 色谱柱为Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm);流动相为A: 0.5%甲酸-水,B: 乙腈梯度洗脱,洗脱程序为:0~25 min 13%~20% B, 25~40 min 20%~20% B, 40~55 min 20%~22% B, 55~60 min 22%~28% B, 60~70 min 28%~28% B, 70~75 min 28%~32% B,75~90 min 32%~32% B,90~100 mim 32%~70%B, 100~105 min 70%~90% B, 105~120 min 90%~90% B;检测波长:330 nm;柱温:30 ℃;流速:0.7 mL·min-1。 2.3.2 阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿魏酸、阿