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pfic1基因突变与发病机制研究进展 慢性肝内胆汁积聚（pfic）是一种常染色体隐性遗传疾病。由于突变，胆胆子的排液酶障碍。临床上，肝脏内胆汁积聚是主要形式，通常在儿童和儿童时期出现，并最终发展为肝脏衰竭。根据其致病基因不同, PFIC主要分为3型:PFIC1由ATP8B1基因突变引起, 导致该基因编码的P型ATP酶——FIC1缺陷;PFIC2源于编码胆盐排泄泵 (bile salt expor pump, BSEP) 蛋白的基因ABCB11突变;PFIC3为编码多药耐药糖蛋白 (MDR3) 的ABCB4基因的突变。 1 新生儿血肿堆积性肝炎的排除 PFIC的诊断依靠临床表现、血生化、胆汁成分分析、肝组织病理学检查以及基因检测等综合判断, 并需要排除其他原因所致的胆汁淤积性肝病。虽然PFIC的3种类型都表现为胆汁淤积, 但又具备各自的特点, 以下将从临床特点、肝脏病理改变和基因突变3方面来进行综述。 1.1 肝内和肝外胆囊pfic3 PFIC1患者通常在出生后几周就发病, 表现为瘙痒和黄疸。在发病早期可呈间歇性, 但逐渐发展为持续性症状。同时具有肝外表现是PFIC1的特征所在。原因是ATP8B1基因缺陷在耳、小肠、胰腺等肝外器官同时存在, 肝外表现为生长发育落后、感音神经性耳聋、水样泻、胰腺炎、汗液电解质浓度升高等。生化检查显示PFIC1患者γ-谷氨酰转肽酶 (γ-GT) 的活性正常甚至低于正常值、胆固醇水平正常、血清胆红素水平略高、转氨酶活性略高, 但鹅脱氧胆酸等初级胆汁酸含量明显升高。影像学或造影技术显示肝内和肝外胆管都无异常。ATP8B1基因突变还可导致良性复发性肝内胆汁淤积 (benign recurrent intrahepatic cholestasis, BRIC), 表现为反复发生的黄疸和瘙痒, 发作时可伴有消瘦和脂肪泻, 但发作间歇期无明显异常, 目前认为是基因突变引起功能蛋白缺陷的程度不一所致。 PFIC2也表现为黄疸和瘙痒, 血γ-GT的活性也是正常甚至降低, 但PFIC2没有PFIC1的肝外症状, 而肝病的临床表现及病情进展却较PFIC1剧烈。出生后几个月就表现出持续性的胆汁淤积性黄疸, 可很快进展为急性肝衰竭。肝细胞癌1岁以前出现, 胆管癌会让PFIC2过程变得更复杂。生化检查显示PFIC2的转氨酶和血清甲胎蛋白比PFIC1高很多。作为基因突变的不同表型, ABCB11突变也可表现为良性复发性肝内胆汁淤积, 还可表现为妊娠期肝内胆汁淤积、药物性胆汁淤积、新生儿一过性胆汁淤积等。 PFIC3发病稍晚, 通常在生命的头几年, 少数会在学龄期甚至青少年时期才起病, 表现为胆汁淤积和瘙痒, 但瘙痒程度较PFIC1和PFIC2轻。血生化γ-GT活性持续增高能把PFIC3与PFIC1和PFIC2区分开来。PFIC3致病基因MDR3突变所致的疾病谱更广, 包括妊娠期肝内胆汁淤积、药物性胆汁淤积、新生儿一过性胆汁淤积、胆结石、胆汁性肝硬化等。 1.2 黄螯虾fic1蛋白在肝组织病理学的表达 PFIC1肝组织最特征的表现为电镜下的粗颗粒状胆汁, 称为“Byler bile”。PFIC1的部分肝细胞可按管状模式排列, 形成腺泡样假玫瑰花结。其他非特异的表现有:肝细胞空泡变性、轻微的炎性细胞浸润、毛细胆管内胆汁淤积、汇管区轻微的小管增生和纤维化等, 但肝巨细胞的形成不明显 (图1)。目前尚无FIC1蛋白的商用抗体用于PFIC1的免疫组化诊断。 PFIC2肝组织病理改变重, 肝脏失去正常肝脏所表现的小叶结构, 汇管区和细胞间隔纤维化明显, 毛细胆管和肝细胞同时存在胆汁淤积, 炎性细胞浸润较多, 特征性的表现在于明显的肝巨细胞的形成, 电镜下胆汁呈细丝状、细颗粒状或无定形状, 微绒毛缺失。BSEP的免疫组化染色可显示该蛋白表达的缺乏或明显下降 (图2)。 PFIC3肝组织的病理改变类似于肝外胆道闭锁者肝脏, 有胆管增生和纤维化两个突出表现。增生的胆管被认为是真正的胆管, 而不是PFIC1者肝细胞的胆管上皮细胞化生;纤维化轻重程度不一, 可以仅仅是汇管区的纤维化, 也可以是整个肝组织的广泛纤维化, 疾病晚期则表现为胆汁性肝硬化。胆汁淤积程度不一, 肝细胞、毛细胆管、各级胆管均可受累。MDR3蛋白的免疫组化染色可以显示该蛋白在肝脏组织的表达情况 (图3)。 1.3 rt-pcr和测序检测 PFIC1的ATP8B1基因、PFIC2的ABCB11基因和PFIC3的ABCB4基因均有27个外显子, 通常基因诊断先对27个外显子和其间的接头进行DNA测序分析, 必要时可采用RT-PCR和测序检测非编码序列和内含子的突变以及剪接错误, 或者进行全基因测序。目前已有相关的基因芯片技术可同时对多种胆汁淤积性肝病的基因突变进行检测。 对于基因测