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中药的现代研究进展 液体质量联合分析技术是20世纪90年代开发的一种综合分析技术。lc的高分离效率、ms的高灵敏度和高选择性成为药物研究的重要工具。API (包括ESI和APCI) , MALDI, TSP和FAB等离子化方式以及各种多级质谱技术的出现, 使该项联用技术日益成熟并逐渐被人们接受。中药有几千年的历史, 是中华民族优秀文化传统的重要组成部分, 现也已成为世界主流医学重要的一部分。我国拥有世界上最丰富的天然药用资源, 中药要创新发展, 要开发“安全、高效、稳定、可控”的现代中药产品, 就需要对中药基本内容给予现代科学的阐述。液质联用技术的发展为中药药效物质基础、质量控制以及药理学研究提供了一个高效、可靠的分析方法。 1 质谱检测技术 液质联用技术在中药成分分析研究中已经得到了广泛的应用, 包括对已知成分的定性定量分析, 在对未知成分的研究中, 质谱检测器可以给出大量的结构信息, 结合同类已知结构化合物的裂解规律, 或结合其它检测方法, 即可对未知成分进行直接分析, 因此在以生物活性为指导的化学筛选中, 可以对目标化合物进行靶分析。表1总结了2004年以来的部分研究实例。 2 指纹图谱的建立及技术应用 指纹图谱是国际公认的控制中药或天然药物质量最有效的方式之一, 也是我国中药走向现代化的一个重要内容。LC-MS联用技术的应用弥补了紫外检测的不足, 还提供了大量的化学成分信息, 可实现对各主要流出组分的定性, 从而为药材及其制剂的鉴别及质量评价提供更加全面、可靠的依据。 余静等采用HPLC-UV-MS法分别对刺五加药材水溶性和脂溶性成分进行指纹图谱研究, 并分别对水溶性成分指纹图谱中5个色谱峰和脂溶性成分指纹图谱中8个色谱峰进行了初步定性。根据化合物的质荷比、提取离子色谱 (EIC) 以及相关文献, 对图中主要色谱峰进行了初步归属, 主要成分为丁香苷、绿原酸、异绿原酸、咖啡酸、刺五加苷B1、芥子醛等。两张指纹图谱相互补充, 为刺五加药材的相关研究提供了较全面的参考。邓亦峰等用HPLC- (-) APCI-MS方法建立了半边旗的总离子流色谱图, 对不同地区和不同采集时间的半边旗LC-MS图谱中的主要色谱峰进行了对比分析和质谱鉴定, 鉴定了贝壳杉烷系二萜化合物4F, 5F, 6F的色谱峰, 比较了各样品中的含量。李松林等应用HPLC-DAD-MS联用技术测定四川GAP示范基地3个公司的9个川芍样品, 结果有21个共有峰, 通过参考文献资料鉴定11个色谱峰对应之化合物:阿魏酸、川芎酽内酯I和H、Coniferylferulate、藁本内酯等。所建立的液相色谱指纹谱特征性和专属性强, 可作为川芎药材内在质量控制的有效方法。丁岗等应用LC-MS技术指认了茯苓药材指纹图谱中的9个主要色谱峰。张尊建等采用HPLC-UV-MS法对密花石斛进行指纹图谱研究, 标示了9个共有峰, 对其部分色谱峰进行了初步定性, 有泽兰内酯、鼓槌联苄、大黄素或芦荟大黄素等。王源园等构建牛膝药材的指纹图谱, 标示了4个共有峰, 并借助LC-MS技术归属为5-羟甲基糠醛、蜕皮甾酮等。张尊建等采用HPLC-UV-MS法对忍冬和山银花药材进行指纹图谱的研究, 确认了忍冬指纹图谱中的8个色谱峰 (熊果酸、绿原酸、十三烷酸、香芥酚、corymbosin、3-甲基-4-羟基肉桂酸、异绿原酸、丁香酚等) 和山银花图谱中的5个色谱峰 (绿原酸、香芥酚、丁香酚、异绿原酸、咖啡酸等) , 并比较了2种药材指纹图谱的差异。 曹进、戴德舜等利用LC/MS联用技术对桂枝汤A部分及组成桂枝汤的五味单味药的A部分进行了多维全息化学特征谱的指认, 对桂枝汤A部分产生双向调节作用的物质基础进行了初步讨论, 从结果可以看出双向调节与单向样品差别来源主要是在煎煮、提取过程中不同物质溶解率、萃取率的不同, 使得各个物质在最终样品中含量的不同, 导致了药效的不同。这提示了桂枝汤A部分的提取工艺的研究应作进一步的考察, 建立切实有效的质量控制方法, 以保证最终质量的稳定。张尊建等得到分离度较好的丹参药材、中间体及注射液的HPLC-UV及HPLC-MS指纹图谱, 为丹参药材、中间体及注射液的质量控制提供全面、可靠的依据, 根据化合物的质荷比及相关的文献, 对图中的主要色谱峰进行了MS归属, 结果表明丹参在制备过程中所含成分发生了较大变化。李茜等采用LC-MS法归属了丹参葡萄糖注射液指纹图谱的主要成分。王颖等采用LC-MS技术制定了中药三七 (包括药材、中间体及针剂成品) 的指纹图谱, 对图中的各主要色谱峰进行了分子量归属, 为三七皂苷R1、Rg1、Rb1、Rd或Re等。马仁玲等建立了中药苦参 (包括药材、中间体及注射液成品) 中生物碱类成分指纹图谱的测试方法, 比较了相关性。张尊建等研究脉络宁注射液 (