胃黏液癌中nm23、muc1、muc2蛋白表达与浸润转移的关系.docxVIP

胃黏液癌中nm23、muc1、muc2蛋白表达与浸润转移的关系 胃粘液瘤是分泌大量粘液的基本特征，具有强烈的侵蚀性、快速进展和较差的预后性。本文对胃黏液癌进行黏液组化,探讨其黏液成分与胃黏液侵袭转移的关系,再对其进行nm23、MUC1、MUC2蛋白表达水平检测,为胃黏液癌患者的诊断与治疗提供分子生物学依据。 1 材料和方法 1.1 胃黏膜癌的分离 均取自哈尔滨医科大学第一临床医学院、哈尔滨医科大学第二临床医学院、齐齐哈尔医学院附属医院胃癌手术切除的标本。胃黏液癌共57例,其中黏液腺癌29例,印戒细胞癌28例。57例胃黏液癌组织中,男39例,女18例;年龄25～78岁,平均年龄58.5岁。 1.2 常规染色和免疫组化染色 所有组织标本放入10%中性福尔马林液中固定,常规石蜡包埋,行4μm连续切片6片,分别行常规病理HE染色、黏液组化染色和免疫组化染色。试剂①AB(pH2.5)/PAS、HID/AB(pH2.5)染色试剂盒,购自广州市俪科贸易有限公司②鼠抗人nnm23、MUC1、MUC2单克隆抗体,SP试剂盒,均购自北京中杉金生物技术有限公司。 1.3 免疫组化结果 黏液组化结果判定:经AB(pH2.5)/PAS黏液组化染色,中性黏液呈红色,氮乙酰化唾液酸黏液呈蓝色,混合黏液呈紫红色。经HID/AB(pH2.5)黏液组化染色,硫酸黏液呈黑色或棕黑色,唾液酸黏液呈蓝色。 免疫组化结果判定:nm23阳性结果判定:凡在细胞浆着色呈棕黄色颗粒或团块大于5%为阳性表达,细胞浆着色小于5%为阴性。MUC1阳性结果判定:细胞膜、胞浆均着色,呈棕黄色颗粒大于5%为阳性表达,细胞膜、胞浆着色小于5%为阴性。MUC2阳性判定:凡细胞浆着色呈棕黄色颗粒大于5%阳性,细胞浆着色小于5%阴性表达。 统计处理 采用SPSS统计软件,数据间用χ2检验,P0.05为差异有显著性。 2 结果 2.1 溶液腺癌和印戒细胞癌组织病理学检测 AB/PAS染色结果:中性黏液呈红色为胃型,酸性黏液呈蓝色为肠型,混合型黏液呈紫红色。在本组57例胃黏液癌中,黏液腺癌以分泌酸性黏液的肠型为主,印戒细胞癌以分泌中性黏液的胃型为主(图1,2)。HID/AB染色结果:硫酸黏液呈黑色或棕黑色为大肠型,唾液酸黏液呈蓝色为小肠型。在本组中,黏液腺癌和印戒细胞癌间未发现显著偏差(图3,4)。黏液癌的黏液性质在浸润深度和淋巴结转移不同组间均无统计学差异(表1)。 2.2 免疫组织化学的结果 2.2.1 不同水浸深度和有淋巴结转移的各组n23、puc1蛋白表达水平比较 nm23、MUC1、MUC2 3种蛋白在胃黏液癌中的阳性表达率分别为36.84%、64.91%、56.14%。nm23、MUC1蛋白表达在不同浸润深度和有无淋巴结转移的两组之间差异显著(P0.05),其余不同分组的表达均无显著性差异。MUC2蛋白表达在不同组织学类型两组之间差异显著(P0.05),其余不同分组的表达均无显著性差异(表2)。 2.2.2 各组患者mec2蛋白表达的比较 nm23与MUC1蛋白表达在黏液性质分组的不同组间均无显著差异性,MUC2蛋白表达在胃型与肠型间差异显著(P0.05)其余不同分组的表达差异均无显著性(表3)。 3 胃评价对乳腺癌n23-l1表达的影响 从上述胃黏液癌的黏液组化观察结果显示,癌细胞既具有胃黏膜上皮细胞所分泌的中性黏液,又具有肠上皮细胞所分泌的酸性黏液,并可见2种黏液的混合存在。这些结果都说明了肿瘤细胞具有向胃、肠两方向分化的特征。 nm23是1988年Steeg首次从小鼠K-1735黑色素瘤的不同转移潜力的细胞系中,经差示杂交分离出来的。nm23-H1基因编码的产物与二磷酸核苷激酶(NDPK)的α一链氨基酸序列高度同源,催化GTP-GDP转化,参与微管聚合及G蛋白介导黏膜的信号转导;其蛋白氨基酸顺序中含2个亮氨酸拉链结构,能促进蛋白二聚体形成,有利于碱性氨基酸区域DNA结合,nm23-H1基因低表达可引起一系列编码产物减少,引起一序列信号转导异常,加速肿瘤细胞发生发展与移动。nm23-H1的表达中,侵及浆膜层组表达阳性率显著低于未侵及浆膜层组(P0.05),伴淋巴结转移组显著低于无淋巴结转移组(P0.05)。表明抑癌基因nm23-H1的丢失与胃癌的侵袭力、淋巴结转移密切相关。本组黏液腺癌组与印戒细胞癌组nm23-H1表达率均低,差异无显著性意义。 MUC1是一种膜糖蛋白,在正常细胞主要表达于细胞膜极性面,即胞膜的近管腔或腺腔面,不被免疫系统所识别。而在癌细胞中胞膜和胞浆均表达,且胞膜的极性分布丧失。其核心蛋白部分常缺乏糖基化或畸形糖基化,导致瘤细胞表面出现新的蛋白表位或糖抗原表位,可为免疫系统识别,成为肿瘤特异的抗原。Lee等报道,胃癌组织中MUC1阳性表达,且可作为胃癌患者的一个预后