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PtFLC选择性剪切本的遗传转化及功能分析的开题报告

一、研究背景

植物花期调控在植物的生殖生长过程中起着至关重要的作用。FLC(FLOWERINGLOCUSC)基因作为植物刺激还是抑制开花的关键基因，在其表达和调节中是十分复杂的。在PTFLC(PisumsativumFLOWERINGLOCUSC)基因的研究中，以前的研究表明，其含有的选择性消息RNA(smRNA)们起到了一种基因表达调控作用，但是传统的研究方式往往难以直接证明smRNA的功能和作用机制。

因此，本项目旨在通过遗传转化的方法，针对PTFLC基因里面的特定smRNA进行针对性突变，以研究其在基因表达调控中的功能和作用机制，进一步阐明PTFLC基因的调控机制与植物开花的关系。

二、研究目标

通过对PTFLC的一个或多个smRNA进行突变，观测和研究其对植物生长发育的影响，以及对PTFLC基因表达调节上的影响，最终揭示PTFLC的调节机制和植物开花过程的机制。

三、研究内容和方法

1.基因选择和克隆

采用PCR克隆，挖掘目标区域内含有smRNA的突变位点，并进行突变构建基因表达载体，然后将载体植入转化PTFLC的大豆植株。

2.转基因植物筛选

通过结合外部检测和内部检测，筛选出含有突变基因的正常表达的植物，并进行培育、生长和F2代的筛选，以获得杂合和纯合的工具植物。

3.对PTFLC结构和功能的分析

对PTFLC基因和smRNA的表达和调节进行测试，观测和比较研究较为详细的PTFLC生长发育和开花的生理生化特征，并通过RNA组学和蛋白组学研究分析PTFLC基因表达和调节时的分子调节机制。

四、研究预期成果

通过对PTFLC单或多个smRNA的突变，研究其调节机制和植物开花过程中的机制，在揭示PTFLC调节机制、研究植物开花机制等方面有新的发现和贡献。同时，本项目也为深入了解其他植物花期调控基因的作用机制奠定了基础。