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考点39基因工程应用及蛋白质工程
一、课型:二轮复习课
教学目标
举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质。
2.举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。
三、教学重点
基因工程的应用、蛋白质工程的原理及应用
四、教学难点
蛋白质工程的原理
五、教学过程
导入:我们已经学习了基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用,改善了人类的生活品质。还了解了蛋白质工程的原理及应用。
1.思维导图
2.重难点及典例分析
重难点一、乳腺生物反应器及生物工程菌
乳腺能成为基因工程药物最理想的表达场所的原因
(1)乳腺是一个外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。
(2)从乳汁中获取目的基因产物,产量高、易提取,表达的蛋白质已经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性。
(3)从乳汁中源源不断获得目的基因产物的同时,不影响转基因动物的繁殖
例1、继哺乳动物乳腺生物反应器研究成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答下列问题:
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是__________。
(2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入__________________中,原因是__________________。
(3)通常采用_________技术检测外源基因是否插入了小鼠的染色体DNA上。
(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的____________细胞中特异表达。
(5)若使外源基因在乳腺细胞中表达,在构建基因表达载体时,还需加入_________________等调控元件。启动子的作用是______________。
答案:(1)显微注射法
(2)受精卵受精卵的全能性高
(3)DNA分子杂交技术
(4)膀胱上皮
(5)乳腺蛋白基因的启动子
作为RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录
例2、通过基因工程的方法可实现β-珠蛋白的大量生产。请回答下列问题:
(1)若采用基因工程的方法使大肠杆菌产生鼠的β-珠蛋白,则目的基因最好从____________________(填基因组文库或cDNA文库)中获取,原因是________________________________________。
(2)利用乳腺生物反应器生产β-珠蛋白时,首先需要将β-珠蛋白基因与__________________等调控元件重组在一起,常通过_______________方法将目的基因导入哺乳动物的受精卵中,进而培养出可在乳腺细胞中表达β-珠蛋白的转基因动物。
(3)获得乳腺生物反应器的过程中,可在胚胎的囊胚期取___________细胞对胚胎进行性别鉴定,选择____________胚胎进行移植。最终所得转基因动物中只有乳腺细胞产生了β-珠蛋白,其原因是______________。
(4)与利用乳腺生物反应器相比,利用工程菌生产β-珠蛋白的优点是____________________________________。
答案:(1)cDNA文库大肠杆菌是原核生物,cDNA文库中没有内含子(非编码序列),基因结构与原核细胞的基因结构更接近
(2)乳腺蛋白基因的启动子显微注射
(3)滋养层雌性只有乳腺细胞中的目的基因进行了选择性表达,合成了β?珠蛋白
(4)工程菌代谢旺盛,繁殖周期短,可以在短期内实现目的基因的大量扩增和表达
重难点二、基因工程的应用
例1.下列关于基因工程的叙述,正确的是()
A.若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶,则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定
B.抗除草剂基因转入某抗盐植物,获得2个稳定遗传转基因品系,抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关
C.抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株,其DNA检测均含目的基因,抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA
D.已知不同分子量DNA可分开成不同条带,相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后,出现3条带,表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置
答案:D
重难点三、蛋白质工程(原理和应用)
蛋白质工程的概念
以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。
蛋白质工程的基本原理
改造或合成基因(来定向改造现有蛋白质或制造新的蛋白质)
蛋白质工程流程图
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