生物成长训练：专题课题多聚酶链式反应扩增DNA片段.docxVIP

学必求其心得，业必贵于专精

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主动成长

夯基达标

1。DNA的羟基(—OH）末端称为（）

A.3′端 B。5′端 C。1′端 D.2′端

解析：DNA的两条链是反向平行的，为了明确地表示DNA的方向，通常将DNA的羟基（—OH）末端称为3′端.

答案：A

2.DNA复制过程中前提是（)

A。获得引物 B.催化合成DNA子链

C.解旋 D.4种脱氧核苷酸

解析:在DNA的复制过程中,双链的解开是进行DNA复制的前提。

答案：C

3。PCR操作中，从第二轮循环开始扩增的DNA片段（）

A.固定长度 B.一端固定 C。都不固定 D.不能确定

解析：从第二轮循环开始,由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列。

答案：A

4.引物的作用是（）

A.打开DNA双链 B。催化合成DNA子链

C.使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制 D。提供模板

解析：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3′端延伸DNA链，引物的作用就在于此.

答案：C

5.DNA合成方向是（）

A.从子链的3′端向5′端延伸 B.从引物的5′端开始延伸

C。从子链的5′端向3′端延伸 D.以上皆可

解析：DNA聚合酶能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。

答案：C

6。PCR过程中DNA复性所需的温度条件为（）

A.90℃以上 B。72℃左右 C。80℃左右 D.50℃左右

解析：在80～100℃的温度范围内DNA变性；在温度下降到50℃左右时复性。

答案：D

7.下图是哪次循环的产物（）

A.第一次循环 B.第二次循环 C。第三次循环 D。第四次循环

解析：根据引物的特点，可以确定为第一次循环。

答案：A

8.从第二次循环开始，复制的DNA片段呈扩增（）

A.直线 B。指数 C。对数 D.不变

解析：从第二轮循环开始，复制的DNA片段呈指数扩增.

答案：B

9.PCR具体操作时用(）

A.微量离心管 B。微量移液管 C.玻璃试管 D.塑料瓶

解析：在实验室中,做PCR通常用微量离心管，它是一种薄壁塑料管,总容积为0。5mL。具体操作时用微量移液管将各组分加到微量离心管中。

答案:AB

10.PCR利用了DNA的原理,来控制DNA的解聚与结合（)

A。特异性 B。稳定性 C。热变性 D。多样性

解析:PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合.

答案：C

11。TaqDNA聚合酶是从一种嗜热细菌中分离提取的，该菌是1966年从美国黄石国家森林公园的一个热泉中发现的。实验表明，PCR反应时变性温度为95℃，50个循环后，TaqDNA聚合酶仍有65％的活性。TaqDNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR的前提条件，也是PCR技术能迅速发展和广泛应用的原因。TaqDNA聚合酶还具有逆转灵活性，其作用类似于逆转录酶。TaqDNA聚合酶表现为Mg2+依赖，该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。测定结果为MgCl2浓度在2。0mmol/L时该酶催化活性最高,此浓度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+过高就抑制酶活性，因而MgCl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度.TaqDNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,而无3′→5′外切酶活性,它不具有校对活性。因而在PCR中如发生某些碱基的错配,该酶是没有校正功能的。TaqDNA聚合酶的碱基错配几率为2.1×10—4。

（1）TaqDNA聚合酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以加入，(填“需要”或“不需要）再添加。

(2）影响PCR反应的影响因素除引物、反应温度、时间和TaqDNA聚合酶浓度外，从材料中可知，还应有.

（3）这种嗜热细菌能够在热泉中生存,这是的结果。

（4）PCR中由碱基错配引起的变异属于。假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占.

解析：此题考查阅读能力。要求能从所给的材料中获取新知识,科学地接受知识并进行逻辑推理.由于文字较多，首先快速阅读获得大致信息,然后根据问