2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

选择性必修三授课人:罗桂莲授课时间：2025.3.6第二章第2节动物细胞工程（第2课时）

学习目标0102理解动物细胞融合技术的概念掌握单克隆抗体的制备过程及其在临床上的应用

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体“生物导弹”追踪癌细胞抗体

植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新的作物类型。回顾—植物体细胞杂交技术

实例：1970年人-鼠细胞融合融合实验回顾--必修一：细胞膜的结构

请同学们快速阅读课本P48页回答以下问题

1.什么是动物细胞融合技术（概念）？原理是什么？2.所形成的杂种细胞有什么特点？3.诱导动物细胞融合的方法有哪些？4.动物细胞融合技术的意义和应用有哪些？

一.动物细胞融合技术概念:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术原理诱导方法*灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的诱导融合方法融合完成的标志：细胞核的融合仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）1、什么是病毒的灭活？灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。2.为什么能用灭活的病毒能诱导动物细胞膜的融合？细胞膜的流动性化学法：PEG融合法物理法：电融合法生物法：灭活病毒诱导法

一.动物细胞融合技术灭活病毒诱导细胞融合过程：正在融合的鸡血细胞正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞

意义：①突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能；②研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。③利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。一.动物细胞融合技术

项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理用_____________和__________去壁后诱导原生质体融合用____________使细胞分散后诱导细胞融合诱导融合的方法意义和用途获得杂种_________获得细胞膜的流动性植物细胞全能性细胞膜的流动性纤维素酶果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶①物理法:电融合法、离心法等②化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等电融合法、PEG融合法、还有生物法：灭活病毒诱导法制备单克隆抗体植株总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合杂交细胞，

☆抗体1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。2.抗体的分布：1）血清（主要）2）组织液及外分泌液（如乳汁中，为新生儿提供抗体）3.机体通过什么免疫过程分泌抗体？体液免疫二、单克隆抗体的制备和应用

抗原不纯抗体不纯传统抗体制备方法及缺陷缺陷：抗体产量低、纯度低，而且特异性差。动物体内抗原刺激浆细胞抗体B细胞增殖分化如何解决这个问题呢？

科学家发现B淋巴细胞有什么特点？怎样才能获得大量的单一抗体？体外培养时，一个活化的B淋巴细胞不能无限增殖问题１：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的科学家发现：１.体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上２.每个B细胞只分泌一种特异性的抗体单克隆抗体克隆单个活化的B淋巴细胞细胞群抗体遗憾：癌细胞动物细胞融合问题２：有什么方法能使活化的B细胞产生抗体的能力和无限增殖能力同时具备

1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验阅读课本P48-49,了解单克隆抗体的制备过程一个大胆的猜想1975年，米尔斯坦和柯勒1984年，诺贝尔生理学或医学奖动物细胞融合杂交细胞动物细胞培养抗体杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体骨髓瘤细胞（能无限增殖）一个活化的B淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体）单克隆抗体

二★单克隆抗体制备的过程

单克隆抗体的制备注射特定抗原从脾脏中获取B淋巴细胞骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞目的是获得产生特定抗体的B淋巴细胞骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合诱导融合为获得大量免疫过的小鼠B淋巴细胞，可采取的措施是分多次间隔给小鼠注射抗原。

骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合第一次筛选多种杂交细胞选择培养基培养筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞既能迅速大量增殖又能产生抗体特点目的：得到杂交瘤细胞（多种）诱导融合后得到多种杂交细胞，还有未融合细胞等。融合体系中出现多种类型细胞的原因：细胞融合是随机的，且融合且达不到100%。原理：在选择培养基上，未融合的