6食品安全食品中维生素B的测定.pptx

中华人民共和国国家标准

GB5009.84—2016

食品安全国家标准

食品中维生素B1的测定

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

2016-08-31发布

2017-03-01实施

发布

GB5009.84—2016

前言

本标准代替GB/T5009.84—2003《食品中硫胺素(维生素B1)的测定》、GB5413.11—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定》、GB/T7628—2008《谷物中维生素B1的测定》、GB/T9695.27—2008《肉与肉制品维生素B1含量测定》。

本标准与GB/T5009.84—2003相比,主要变化如下:

—标准名称修改为“食品安全国家标准食品中维生素B1的测定”;

—增加了高效液相色谱法,作为第一法,将荧光光度法作为第二法;

—修改了检出限的表达,增加了方法的定量限;

—增加了人造沸石预处理中氯离子的定性鉴别方法;

—增加了溴甲酚绿为指示剂时,溶液颜色的变化特征;

—删去了图1(反应瓶)和图2(盐基交换管)结构图;

—增加了人造沸石以湿重表示时的称取量。

Ⅰ

1范围

本标准规定了高效液相色谱法、荧光光度法测定食品中维生素B1的方法。

本标准适用于食品中维生素B1含量的测定。

第一法高效液相色谱法

2原理

样品在稀盐酸介质中恒温水解、中和,再酶解,水解液用碱性铁氰化钾溶液衍生,正丁醇萃取后,经C18反相色谱柱分离,用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量。

3试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。

3.1试剂

3.2试剂配制

3.2.1铁氰化钾溶液(20g/L):称取2g铁氰化钾,用水溶解并定容至100mL,摇匀。临用前配制。

3.2.2氢氧化钠溶液(100g/L):称取25g氢氧化钠,用水溶解并定容至250mL,摇匀。

3.2.3碱性铁氰化钾溶液:将5mL铁氰化钾溶液与200mL氢氧化钠溶液混合,摇匀。临用前配制。

3.2.4盐酸溶液(0.1mol/L):移取8.5mL盐酸,加水稀释至1000mL,摇匀。

3.2.5盐酸溶液(0.01mol/L):量取0.1mol/L盐酸溶液50mL,用水稀释并定容至500mL,摇匀。

3.2.6乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取6.80g乙酸钠,加900mL水溶解,用冰乙酸调pH为4.0~5.0之间,加水定容至1000mL。经0.45μm微孔滤膜过滤后使用。

3.1.1

正丁醇(CH3CH2CH2CH2OH)。

3.1.2

铁氰化钾[K3Fe(CN)6]。

3.1.3

氢氧化钠(NaOH)。

3.1.4

盐酸(HCl)。

3.1.5

乙酸钠(CH3COONa·3H2O)。

3.1.6

冰乙酸(CH3COOH)。

3.1.7

甲醇(CH3OH):色谱纯。

3.1.8

五氧化二磷(P2O5)或者氯化钙(CaCl2)。

3.1.9

木瓜蛋白酶:应不含维生素B1,酶活力≥800U(活力单位)/mg。

3.1.10

淀粉酶:应不含维生素B1,酶活力≥3700U/g。

食品安全国家标准

食品中维生素B1的测定

GB5009.84—2016

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GB5009.84—2016

3.2.7乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.2g乙酸钠,用水溶解并定容至100mL,摇匀。

3.2.8混合酶溶液:称取1.76g木瓜蛋白酶、1.27g淀粉酶,加水定容至50mL,涡旋,使呈混悬状液体,冷藏保存。临用前再次摇匀后使用。

3.3标准品

维生素B1标准品:盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS·HCl)),CAS:67038,纯度≥99.0%。

3.4标准溶液配制

3.4.1维生素B1标准储备液(500μg/mL):准确称取经五氧化二磷或者氯化钙干燥24h的盐酸硫胺素标准品56.1mg(精确至0.