酶的发酵生产课件.pptVIP

第三節發酵工藝條件及控制可見添加誘導物對提高酶產量有非常顯著的效果。進一步研究和開發高效廉價的誘導物有著重要的意義和應用前景。2．控制阻遏物濃度如前所述，有些酶的生物合成受到阻遏物的阻遏作用。為了提高酶的產量，必須設法解除阻遏作用。阻遏作用有產物阻遏和分解代謝物阻遏兩種。阻遏物可以是酶催化反應產物，代謝途徑的末端產物以及分解代謝物（葡萄糖等容易利用的碳源）。控制阻遏物濃度是解除阻遏、提高酶產量的有效措施。第三節發酵工藝條件及控制3．添加表面活性劑表面活性劑可分為離子型和非離子型兩大類。離子型表面活性劑又有陽離子型、陰離子型和兩性離子型之別。由於離子型表面活性劑有些對細胞有毒害作用，特別是季胺型離子表面活性劑（如“新潔爾滅”等）是消毒劑。不能用於酶的發酵生產。非離子型表面活性劑，如：吐溫（Tween）、特裏頓(Triton)等，可積聚在細胞膜上，增加細胞的通透性，有利於酶的分泌，所以可增加酶的產量。例如，在黴菌發酵生產纖維素酶的培養基中，添加1%的吐溫，可使產酶量提高1-20倍。在使用時，要注意表面活性劑添加量，過多或過少都效果不好，應控制在最佳濃度範圍內，此外，添加表面活性劑有利於提高某些酶的穩定性和催化能力。第三節發酵工藝條件及控制4．添加產酶促進劑產酶促進劑是指可以促進產酶、但作用機理並未闡明清楚的物質。添加產酶促進劑往往對提高酶產量有顯著效果。例如，添加植酸鈣鎂可使黴菌蛋白酶和桔青黴磷酸二酯酶的產量提高1-20倍。添加聚乙烯醇(Polyvinylalcohol)可提高糖化酶的產量。聚乙烯醇、醋酸鈉等對提高纖維素酶的產量也有效果等。產酶促進劑對不同細胞、不同酶的作用效果各不相同，要通過試驗選用適當的產酶促進劑並確定一個最適濃度。第四節固定化細胞發酵產酶固定化細胞又稱固定化活細胞或固定化增殖細胞，是指用各種方法固定在載體上又能進行生長、繁殖和新陳代謝的細胞。固定化細胞是20世紀70年代後期才發展起來的技術，有關細胞固定化方法及其特性，留待本書第六章闡述。本節僅介紹其發酵產酶的特點。固定化細胞產酶是從1978年開始的，十幾年來，國內外均開展了大量研究，取得了可喜進展。利用固定化細胞發酵生產α-澱粉酶、糖化酶、蛋白酶、果膠酶、纖維素酶、溶菌酶、天冬醯胺酶等胞外酶的研究均取得了成功。第四節固定化細胞發酵產酶固定化細胞又稱固定化活細胞或固定化增殖細胞，是指用各種方法固定在載體上又能進行生長、繁殖和新陳代謝的細胞。固定化細胞是20世紀70年代後期才發展起來的技術，有關細胞固定化方法及其特性，留待本書第六章闡述。本節僅介紹其發酵產酶的特點。固定化細胞產酶是從1978年開始的，十幾年來，國內外均開展了大量研究，取得了可喜進展。利用固定化細胞發酵生產α-澱粉酶、糖化酶、蛋白酶、果膠酶、纖維素酶、溶菌酶、天冬醯胺酶等胞外酶的研究均取得了成功。第四節固定化細胞發酵產酶一、固定化細胞生長固定化細胞在適宜的條件下培養時，固定在載體上的細胞以一定的速度生長，在達到平衡期以後的相當長的一段時間內，固定化細胞的濃度基本上保持恒定。同時，隨著固定化細胞的生長和增殖，有一些細胞洩漏到培養液中，這些洩漏細胞如同游離細胞一樣，在培養液中生長繁殖。根據10多年來的大量試驗結果，固定化細胞發酵生產胞外酶具有如下顯著特點：1．提高產酶率細胞經固定化後，在一定的空間範圍內生長繁殖，細胞密度增大，故可加速生化反應，提高產酶率。例如，固定化枯草桿菌細胞生產α-澱粉酶，在分批發酵時，其體積產酶率（又稱產酶強度）達到游離細胞的122%，在連續發酵時，產酶率更高（表3-1）。固定化細胞的比產酶速率（εg）較游離細胞比產酶速率（εf）高。第二節酶發酵生產常用的微生物七、根黴（Rhizopus）根黴生長時，由營養菌絲產生匍匐枝。匍匐枝的末端圖形出假根，在有假根的匍匐枝上生出成群的孢子囊梗，梗的頂端膨大形成孢子囊，囊內生孢子囊孢子，孢子呈球形，卵形或不規則形狀。根黴用於生產糖化酶、α—澱粉酶、轉化酶、酶性蛋白酶、核糖核酸酶、脂肪酶、果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶等。根黴有強的11α羥化酶，是用於甾體轉化的重要菌株。第二節酶發酵生產常用的微生物八、毛黴（Mucor）毛黴的菌絲體在基質上或基質內廣泛蔓延，菌絲體上直接生出孢子囊梗，分枝較小或單生，