酶的非水相催化课件.pptVIP

酶的非水相催化6.1酶催化反應的介質水是酶促反應最常用的反應介質。但對於大多數有機化合物來說，水並不是一種適宜的溶劑。因為許多有機化合物(底物)在水介質中難溶或不溶。由於水的存在，往往有利於如水解、消旋化、聚合和分解等副反應的發生。是否存在非水介質能保證酶催化？？1984年，克利巴諾夫（Klibanov）等人在有機介質中進行了酶催化反應的研究，他們成功地在利用酶有機介質中的催化作用，獲得酯類、肽類、手性醇等多種有機化合物，明確指出酶可以在水與有機溶劑的互溶體系中進行催化反應。酶非水相催化的幾種類型有機介質中的酶催化有機介質中的酶催化是指酶在含有一定量水的有機溶劑中進行的催化反應。適用於底物、產物兩者或其中之一為疏水性物質的酶催化作用。酶在有機介質中由於能夠基本保持其完整的結構和活性中心的空間構象，所以能夠發揮其催化功能。氣相介質中的酶催化酶在氣相介質中進行的催化反應。適用於底物是氣體或者能夠轉化為氣體的物質的酶催化反應。由於氣體介質的密度低，擴散容易，因此酶在氣相中的催化作用與在水溶液中的催化作用有明顯的不同特點。超臨界介質中的酶催化酶在超臨界流體中進行的催化反應。超臨界流體是指溫度和壓力超過某物質超臨界點的流體。離子液介質中的酶催化酶在離子液中進行的催化作用。離子液（ionicliquids）是由有機陽離子與有機（無機）陰離子構成的在室溫條件下呈液態的低熔點鹽類，揮發性低、穩定性好。酶在離子液中的催化作用具有良好的穩定性和區域選擇性、立體選擇性、鍵選擇性等顯著特點。本章目錄6.2有機介質反應體系非極性有機溶劑?酶懸浮體系(微水介質體系) 用非極性有機溶劑取代所有的大量水，使固體酶懸浮在有機相中。但仍然含有必需的結合水以保持酶的催化活性(含水量一般小於2%)。 酶的狀態可以是結晶態、凍幹狀態、沉澱狀態，或者吸附在固體載體表面上。與水互溶的有機溶劑?水單相體系 有機溶劑與水形成均勻的單相溶液體系。酶、底物和產物都能溶解在這種體系中。非極性有機溶劑?水兩相/多相體系 由含有溶解酶的水相和一個非極性的有機溶劑(高脂溶性)相所組成的兩相體系。不管採用何種有機介質反應體系，酶催化反應的介質中都含有機溶劑和一定量的水。它們都對催化反應有顯著的影響。反應體系對酶酯化反應的影響反應體系含1-三甲基矽-1-乙醇10mM，戊酸10mM，內標正十五烷，脂肪酶50mg，30℃，120rpm條件下振盪反應1：水飽和正已烷10ml，2∶pH7.2緩衝液5ml+正已烷10ml反應體系中水對酶催化反應的影響酶都溶於水，只有在一定量的水存在的條件下，酶分子才能進行催化反應。所以酶在有機介質中進行催化反應時，水是不可缺少的成分之一。有機介質中的水含量多少對酶的空間構象、酶的催化活性、酶的穩定性、酶的催化反應速度等都有密切關係，水還與酶催化作用的底物和反應產物的溶解度有關。酶分子只有在空間構象完整的狀態下，才具有催化功能。在無水的條件下，酶的空間構象被破壞，酶將變性失活。故此，酶分子需要一層水化層，以維持其完整的空間構象。維持酶分子完整的空間構象所必需的最低水量稱為必需水（essentialwater）。有機介質中水的含量對酶催化反應速度有顯著影響。存在最適水含量。反應體系中有機溶劑對酶催化反應的影響常用的有機溶劑有辛烷，正己烷，苯，吡啶，季丁醇，丙醇，乙腈，已酯，二氯甲烷等。在水溶液中，酶分子均一地溶解於水溶液中，可以較好地保持其完整的空間結構。在有機溶劑中，酶分子不能直接溶解，而是懸浮在溶劑中進行催化反應。根據酶分子的特性和有機溶劑的特性的不同，保持其空間結構完整性的情況也有所差別。極性較強的有機溶劑，如甲醇，乙醇等，會奪取酶分子的結合水，影響酶分子微環境的水化層，從而降低酶的催化活性,甚至引起酶的變性失活。因此應選擇好所使用的溶劑，控制好介質中的含水量，或者經過酶分子修飾提高酶分子的親水性，避免酶在有機介質中因脫水作用而影響其催化活性。有機溶劑與水之間的極性不同，在反應過程中會影響底物和產物的分配，從而影響酶的催化反應。本章目錄6.3酶在有機介質中的催化特性酶在有機介質中起催化作用時，由於有機溶劑的極性與水有很大差別，對酶的表面結構、活性中心的結合部位和底物性質都會產生一定的影響，從而顯示出與水相介質中不同的催化特性底物特異性立體選擇性區域選擇性鍵選擇性熱穩定性酶在有機介質中由於水分子的減少，相對來說酶分子的構象表現出比水溶液中更具有“剛性”特點。因而使通過選擇不同性質的溶劑來調控酶的某些特性成為可能。例如在有機溶劑中，可以利用酶與配體的相互作用性質，誘導改變酶