酶工程与食品产业课件.pptVIP

(3)與輔因數相關的修飾(i)依賴輔因數的酶的修飾對依賴輔因數的酶可用兩種方法進行修飾：第一種方法，如果輔因數與酶是非共價結合，則可將輔因數共價結合於酶分子上。第二種方法，引入新的具有強反應的輔因數。金屬酶ALBP-Phen-Cu(II)的合成(ii)金屬酶的金屬取代有些酶含有金屬離子。而且金屬離子往往是酶活性中心的組成部分，對酶的催化功能起重要作用。酶分子中的金屬取代可以改變某些酶的專一性、穩定性及抑制作用。(4)肽鏈伸展後的修飾有科學家描述了一種新奇的、原則上可能普遍適應改變底物專一性的方法，即為有效地修飾酶分子內部的區域，先用脲、鹽酸胍處理酶，使其肽鏈充分伸展，然後讓修飾後伸展肽鏈，在適當條件下，例如，加入相應於所希望酶活力的競爭性抑制劑，然後待獲得所希望酶的構象後折疊成具有某種催化活性的構象，再用戊二醛交聯，以固定這個構象，然後透析除掉這種抑制劑。但至今尚未有成功的先例。3.2模擬酶模擬酶是在分子水準上模擬酶活性部位的形狀、大小及其微環境等結構特徵，以及酶的作用機理和立體化學等特性的一門科學。模擬酶的製備有兩類方法：半合成酶和全合成酶。3.2.1半合成酶它是以天然蛋白質或酶為母體，用化學或生物學方法引進適當的活性部位或催化基團，或改變其結構從而形成一種新的“人工酶”。(1)與金屬或金屬有機物的結合將具有催化活性的金屬或金屬有機物與特異的蛋白質結合可形成半合成酶。例如，電子傳遞催化劑[Rn(BH3)5]3+與巨頭鯨肌紅蛋白結合產生的一種“半合成無機生物酶”。(2)與特異性的物質結合有的半合成酶是與具有特異性的物質相結合而形成的。3.2.2全合成酶這類模擬酶不是蛋白質，而是有機物，通過加入酶的催化基團與控制空間的構象，象自然酶那樣能選擇性地催化化學反應，包括小分子有機物、抗體酶和印跡酶。(1)小分子有機物全合成酶這是利用各種有機分子和金屬離子成功地水解、氧化還原等合成酶。這類合成酶由於不是蛋白質分子，故比天然酶具有更好的穩定性，在化工、日化、食品、醫藥的應用上具有較大的優越性。(2)抗體酶抗體的精細識別性使其能結合幾乎任何天然的或合成的分子，利用兔疫系統的這一特性將抗體開發成適合特定用途的酶，是很有意義的研究。催化抗體是抗體的高度選擇性和酶的高效催化能力巧妙結合的產物，本質上是一類具有催化活力的兔疫球蛋白，在其可變區賦予了酶的屬性，因此，催化抗體也叫抗體酶。(3) 印跡酶分子印跡是製備對某一化合物具有選擇性的聚合物的過程。此技術包括如下內容；①選定印跡分子和功能單休，使二者發生互補反應；②在印跡分子－單體複合物周圍發生聚合反應；③用抽提法從聚合物中除掉印跡分子。結果，形成的聚合物內保留有與印跡分子的形狀、大小完全一樣的孔穴。?分子印跡原理圖P-印跡分子Contents1、酶工程概述2、酶的生產與分離純化3、化學修飾酶與化學人工酶4、固定化酶GoGoGoGoGo5、酶反應器與酶感測器Go6、食品酶工程的應用4、固定化酶所謂固定化酶，是指在一定空間內呈閉鎖狀態存在的酶，能連續地進行反應，反應後的酶可以回收重複使用。4.1固定化酶的製備固定化方法大致可分為四類，即吸附法、共價結合法、交聯法和包埋法。固定化酶模式圖(a)吸附(b)包埋(c)共價結合(d)交聯(1)吸附法將酶液與具有活潑表面的吸附劑接觸，再經洗滌除去不吸附的酶便能制得固定化酶。吸附法分為物理吸附法和離子吸附法。(i)物理吸附法：通過氫鍵等物理作用，將酶固定在水不溶載體上的方法。常用的載體有：無機吸附劑如矽藻土、矽膠等。物理吸附法制成的固定化酶，酶活力損失少，但缺點是酶和載體間的結合力不強，會導致催化活力的喪失和沾汙反應產物。(ii)離子吸附法：是將酶同含有離子交換基的水不溶性載體相結合。酶吸附較牢固，在工業上用途很廣，常用載體有：陰離子交換劑DEAE-纖維素、DEAE-葡聚糖凝膠等。陽離子交換劑，如CM-纖維素等。(2)包埋法將酶物理包埋在高聚物內是一種反應條件溫和、很少改變酶結構的固定化方法。此法的缺點是，只有小分子底物和產物可以通過高聚物網架擴散，對那些底物和產物是大分子的酶並不合適。包埋法分為：凝膠包埋和微囊化兩種。(i)凝膠包埋法通常的做法是先把單體、交聯劑和懸浮在緩衝溶液中的酶混合，然後加入聚合催化系統使之開始聚合，結果