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木薯中碳酸酐酶CA基因的克隆及其功能分析

目录

木薯中碳酸酐酶CA基因的克隆及其功能分析（1）．．．．．．．．．．．．．．．．3

文档概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1木薯简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2碳酸酐酶CA的功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3本研究的目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1碳酸酐酶CA的结构与功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2木薯中碳酸酐酶CA的遗传学研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.3碳酸酐酶CA在木薯生长发育中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

木薯中碳酸酐酶CA基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.1核酸提取及PCR扩增．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

3.2文库构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.3文库筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

3.4cDNA的纯化与定量．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

碳酸酐酶CA基因的测序与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

4.1cDNA序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

4.2基因序列的同源性比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

碳酸酐酶CA的功能分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

5.1体外酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

5.2心理生物学实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

结论与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

6.1木薯中碳酸酐酶CA基因的克隆结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

6.2碳酸酐酶CA的功能分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

6.3本研究的意义与应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

木薯中碳酸酐酶CA基因的克隆及其功能分析（2）．．．．．．．．．．．．．．．40

一、文档简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

1.1木薯的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

1.2碳酸酐酶CA基因的功能研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

2.1木薯基因工程研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

2.2碳酸酐酶基因家族研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

2.3植物碳酸酐酶的功能与特性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

三、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

3.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．58

3.1.1植物材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.1.2试剂与工具酶．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．65

3.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．67