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基因工程试题及参考答案

基因工程试题

一、选择题（每题3分，共30分）

下列哪种酶可特异性识别并切割双链DNA的特定核苷酸序列？（）

A.DNA聚合酶ⅠB.限制性内切核酸酶C.逆转录酶D.解旋酶

基因工程中常用的Ti质粒来源于哪种微生物？（）

A.大肠杆菌B.农杆菌C.酵母菌D.噬菌体

下列哪项不属于基因载体必须具备的条件？（）

A.具有复制起点B.含有多个限制性酶切位点C.具备筛选标记基因D.携带目的基因的启动子

构建cDNA文库时，第一步需要用到的关键酶是（）

A.限制性内切核酸酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.Taq酶

下列哪种技术可用于快速扩增目的基因片段？（）

A.核酸分子杂交B.PCR技术C.基因克隆D.胚胎移植

用于将重组质粒导入大肠杆菌的常用方法是（）

A.农杆菌转化法B.显微注射法C.感受态细胞转化法D.花粉管通道法

基因工程中“分子探针”的作用是（）

A.切割DNA片段B.连接DNA片段C.检测特定核酸序列D.扩增目的基因

下列哪种标记基因可通过颜色反应筛选重组子？（）

A.氨苄青霉素抗性基因B.四环素抗性基因C.β-半乳糖苷酶基因（lacZ）D.潮霉素抗性基因

逆转录PCR（RT-PCR）的核心目的是（）

A.扩增DNAB.扩增RNAC.将RNA逆转录为cDNA后扩增D.检测蛋白质表达

基因治疗中，将目的基因导入人体细胞的常用载体是（）

A.质粒B.噬菌体C.腺病毒载体D.农杆菌Ti质粒

二、填空题（每空2分，共20分）

基因工程的核心步骤包括目的基因的获取、、将重组载体导入受体细胞、。

限制性内切核酸酶切割DNA后产生的末端类型有__________和粘性末端。

DNA连接酶可催化__________键的形成，连接互补的DNA片段。

构建基因组文库时，载体通常选用__________，而构建cDNA文库常用__________作为载体。

筛选含有重组质粒的受体细胞时，常用的筛选方法包括__________筛选和分子杂交筛选。

农杆菌转化法主要用于将目的基因导入__________细胞，其Ti质粒上的__________区域可将目的基因整合到植物基因组中。

PCR技术的三个基本步骤依次是变性、__________、延伸，循环进行可扩增目的基因。

三、简答题（每题10分，共30分）

简述限制性内切核酸酶的作用特点及在基因工程中的应用。

比较基因组文库和cDNA文库的异同点。

简述PCR技术的原理及关键反应成分。

四、综合分析题（20分）

某研究团队欲将大豆的抗虫基因（Bt基因）导入棉花，培育抗虫棉品种。请回答下列问题：

（1）该实验中，目的基因、载体、受体细胞分别是什么？（6分）

（2）简述将Bt基因导入棉花细胞的常用方法及操作流程。（8分）

（3）如何鉴定棉花植株是否成功表达Bt抗虫蛋白？（6分）

参考答案

一、选择题（每题3分，共30分）

B2.B3.D4.C5.B6.C7.C8.C9.C10.C

二、填空题（每空2分，共20分）

重组载体的构建；目的基因的检测与鉴定

平末端

磷酸二酯

噬菌体载体（或粘粒载体）；质粒载体

抗性标记

植物；T-DNA（转移DNA）

退火（复性）

三、简答题（每题10分，共30分）

作用特点：①特异性识别双链DNA上的特定核苷酸序列（通常为回文序列）；②切割位点位于识别序列内部或两侧；③切割后产生粘性末端或平末端。（6分）

应用：①切割目的基因和载体，产生互补末端，为重组载体构建提供基础；②构建限制酶图谱，用于DNA分子鉴定；③基因组DNA的片段化，用于文库构建。（4分）

相同点：均为保存和筛选目的基因的工具，可用于基因克隆和表达研究。（2分）

不同点：①来源不同：基因组文库由基因组DNA酶切构建，包含生物全部基因；cDNA文库由mRNA逆转录为cDNA构建，仅包含表达的基因（2分）；②基因完整性：基因组文库包含内含子、启动子等调控序列，基因结构完整；cDNA文库无内含子，仅含编码区（3分）；③应用场景：基因组文库适用于分离未知功能基因、研究基因结构；cDNA文库适用于研究基因表达、获取编码区序列（3分）。

原理：模拟体内DNA复制过程，通过DNA双链变性、引物与模板退火