基因工程的基本操作程序.ppt

基因工程的基本操作程序第1页，共16页，星期日，2025年，2月5日自学提纲（自学教材P12—P15，完成问题）1、什么叫转化？2、将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？常用的是哪种方法？如何使用？3、将目的基因导入动物细胞的方法是什么？过程？4、将目的基因导入微生物细胞的方法是什么？5、怎样完成目的基因分子水平的检测？6、怎样完成目的基因个体生物水平的鉴定？第2页，共16页，星期日，2025年，2月5日三、将目的基因导入受体细胞转化——方法将目的基因导入植物细胞将目的基因导入动物细胞将目的基因导入微生物细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法——显微注射法——感受态细胞目的基因进入_________内，并且在受体细胞内维持_____和_____的过程受体细胞稳定表达第3页，共16页，星期日，2025年，2月5日1、将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法（1）农杆菌介绍（2）原理及适用范围第4页，共16页，星期日，2025年，2月5日2、将目的基因导入动物细胞（1）方法：显微注射法（2）程序：第5页，共16页，星期日，2025年，2月5日3、将目的基因导入微生物细胞（1）思考：为什么选用微生物作为受体细胞？（2）方法：Ca2+第6页，共16页，星期日，2025年，2月5日四、目的基因的检测与鉴定——检查是否成功检测鉴定——①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因②检测目的基因是否转录出了mRNA③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等方法——方法——方法——DNA分子杂交分子杂交（注意与上不同之处）抗原—抗体杂交第7页，共16页，星期日，2025年，2月5日多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应变化的个体进一步培养、研究。例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。从个体水平鉴定第8页，共16页，星期日，2025年，2月5日DNA分子杂交示意图采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。第9页，共16页，星期日，2025年，2月5日1）以下说法正确的是（）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来C练习第10页，共16页，星期日，2025年，2月5日2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制（）B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNAD练习第11页，共16页，星期日，2025年，2月5日3）有关基因工程的叙述中，错误的是（）A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B、限制性内切酶用于目的基因的获得C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、人工合成目的基因不用限制性内切酶A练习第12页，共16页，星期日，2025年，2月5日