输液泵进样器色谱柱柱温箱检测器单一或混合溶剂.pptVIP

色谱柱1）柱压低于150kgf/cm2（15cm色谱柱）2）柱温在40℃左右，最高使用温度为50℃3）流动相PH使用范围为2～7.5返回ODS柱的使用注意点：流动相注意点离子对试剂的使用具有缓冲盐流动相的使用分析结束及开始流动相平衡加快平衡时间异丙醇的使用LC检测器紫外可见检测器（UV/VIS）二极管阵列检测器（PDA）示差检测器（RID）电导检测器（CDD）荧光检测器（RF）电化学检测器（L-ECD）质谱检测器（MS）蒸发光散射检测器（ELSD）紫外可见检测器原理：基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收定量基础：Lambert-Beer定律，A＝KCL优点：1）对温度和流速变化不敏感2）可用于梯度分析缺点：仅适用于测定有紫外吸收的物质紫外可见检测器样品池参比池光电管光电管EinEinEin光栅D2/W灯lEout紫外可见检测器二极管阵列检测器（SPD－M10AVP）二十一世纪标准紫外检测器色谱信息：保留时间常规紫外检测器紫外光谱二极管阵列检测器样品池二极管阵列（512个单元）光栅D2/W灯每一单元可检测一个波长下的吸光度二极管阵列检测器三维谱图时间波长吸光度色谱光谱检测器原理：连续测定流通池中溶液折射率变化以测定试样各组分浓度。优点：通用型检测器缺点：1）对温度和压力变化敏感2）不能用于梯度分析示差折光检测器返回糖的色谱图AnalyticalConditionsColumn:Shim-packCLC-NH2Mobilephase:Acetonitrile/water=7/3Flowrate:1.0mL/minTemperature:AmbientPeaks1.甘油2.木糖3.果糖4.葡萄糖5.蔗糖6.甘露糖7.乳糖荧光检测器原理:基于被分析组分发射的荧光强度进行检测缺点:仅适用于测定可产生荧光的物质优点:1)灵敏度极高,是最灵敏的检测器之一2)选择性好3)对温度和流速不敏感,可用于梯度洗脱可检测物质:多环芳烃,霉菌毒素,酪氨酸,色氨酸,儿茶酚氨等(具有对称共轭体系)液相色谱流程图输液泵进样器色谱柱柱温箱检测器溶剂数据处理液相色谱日常维护维护流程图吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器检测器管线选择材料不锈钢TeflonPEEK(聚醚酮)尺寸0.1mmI.D.x1.6mmO.D.0.3mmI.D.x1.6mmO.D.0.5mmI.D.x1.6mmO.D.0.8mmI.D.x1.6mmO.D.管线材料不锈钢(可用于所有连接)能承受几千kg/cm2压力酸性或高浓度盐环境中易腐蚀(尤其在pH小于2时)PEEK(可用于所有连接)能承受高达250kg/cm2压力可在整个PH范围(pH1-14)内使用不适用于高溶解性溶剂如氯仿等Teflon(用于柱后阻尼管、反应管和排液管)化学惰性大能承受5kgf/cm2压力接头不锈钢接头/垫圈主要用于输液泵、进样器的连接能承受400kgf/cm2压力一旦固定，垫圈不可再动PEEK接头主要用于色谱柱、检测器的连接易于安装能承受250kgf/cm2压力容易产生死体积不锈钢接头垫圈PEEK接头吸滤头材料：不锈钢烧结，孔径10um故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成措施：用异丙醇（或5％稀硝酸），超声波清洗，再用蒸馏水清洗单向阀T泵：串联式往复泵D泵：并联式往复泵一、色谱起源石油醚碳酸钙颗粒色素色谱组分二、定义色谱法(Chromatography)：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术流动相：携带样品流过整个系统的流体固定相：静止不动的一相HPLC的分离类型正相色谱(NP-HPLC)反相色谱(RP-HPLC)反相离子对色谱(RPIC)