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2025年核酸检测知识考核试题及答案

一、单项选择题（每题1分，共30分）

1.2025版《新型冠状病毒核酸检测质量手册》规定，实验室对阳性样本复检时，复检人员与原检测人员的关系应为

A.同组任意成员

B.同组上级

C.不同组且未参与首轮检测

D.实验室主任指定

答案：C

2.采用磁珠法提取咽拭子RNA时，若样本保存液中含高浓度肝素，最先出现的干扰现象是

A.荧光曲线抬升

B.内标Ct值延迟2

C.扩增效率110%

D.熔解曲线双峰

答案：B

3.在数字PCR体系中，2025年推荐用于降低微滴融合的新增表面活性剂浓度为

A.0.01%Tween-20

B.0.05%TritonX-100

C.0.02%Brij-58

D.0.008%SDS

答案：C

4.关于RNaseP内标，下列说法正确的是

A.可用于评估提取效率

B.可用于评估扩增效率

C.可用于评估采样质量

D.可用于评估逆转录效率

答案：A

5.2025年起，对变异株BA.7.2的检测，推荐引物设计策略为

A.单碱基错配容忍

B.锁核酸修饰3端

C.肽核酸完全替代

D.双缺口探针

答案：B

6.若室内质控品Ct值连续5天呈上升趋势，最先考虑的纠正措施是

A.更换扩增试剂批号

B.校准移液器

C.检查提取仪加热模块

D.重新标定质控品

答案：D

7.在POCT-CRISPR检测中，Cas12a的旁切活性报告探针标记荧光基团为

A.FAM-BHQ1

B.HEX-BHQ1

C.Cy5-BHQ2

D.Rox-BHQ2

答案：A

8.2025版室间质评合格标准，要求单一样本检测结果与靶值偏差不超过

A.±0.3logcopies/mL

B.±0.5logcopies/mL

C.±0.8logcopies/mL

D.±1.0logcopies/mL

答案：B

9.对冷链运输的鼻咽拭子样本，若运输时间超过12h，保存温度应为

A.2-8℃

B.15-20℃

C.-20℃

D.室温

答案：C

10.数字PCR结果中，微滴数低于多少时需重新制备微滴

A.5000

B.8000

C.10000

D.15000

答案：C

11.2025年起，实验室若使用AI判读扩增曲线，AI模型需通过的国家认证标准为

A.GB/T42125-2023

B.YY/T1902-2025

C.ISO/TS23498-2025

D.WS/T585-2024

答案：B

12.对于唾液样本，采用热裂解直扩法时，裂解温度上限为

A.65℃

B.75℃

C.85℃

D.95℃

答案：C

13.若阳性对照出现“S型曲线但Ct40”，应首先

A.判定试剂失效

B.检查探针降解

C.增加循环数

D.降低阈值线

答案：B

14.2025年新版报告单中，必须注明的信息不包括

A.检测限

B.变异株覆盖表

C.采样时间精确到分钟

D.试剂批号

答案：C

15.在扩增体系中加入dUTP-UNG的主要目的是

A.增强特异性

B.防止污染

C.提高灵敏度

D.降低背景

答案：B

16.对于低病毒载量样本（100copies/mL），2025年推荐采用

A.一步法qPCR

B.巢式PCR

C.数字PCR

D.恒温扩增

答案：C

17.若提取产物A260/A280=1.05，提示

A.RNA纯度良好

B.蛋白污染

C.酚残留

D.乙醇残留

答案：B

18.2025年起，实验室每月需进行的阴性质控品数量不少于检测样本总数的

A.1%

B.3%

C.5%

D.10%

答案：A

19.在CRISPR检测中，减少“假阳性”最关键的步骤是

A.增加RNP用量

B.缩短孵育时间

C.设置无靶标空白

D.提高荧光阈值

答案：C

20.若内标未检出而靶标阳性，应

A.报告阳性

B.报告可疑

C.重新采样

D.重新提取

答案：D

21.2025年新版生物安全要求，核酸扩增区气压应为

A.正压

B.负压

C.常压

D.