- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
摘要
糖尿病和高尿酸血症皆为常见多发疾病,且会引发一系列并发症,严重危害人类
健康。因此,体液中葡萄糖和尿酸浓度的准确、快速测定对于相关疾病的诊断、监测
和治疗都具有重要意义。本文以DNA纳米花为载体,构建了集酶催化活性和比率荧光
信号为一体的复合型多功能材料,利用该材料建立了一系列检测葡萄糖和尿酸的荧光
可视化分析方法。具体内容如下:
一、以酶杂化DNA纳米花为载体的比率荧光复合材料用于葡萄糖的可视化检测。
利用滚环扩增技术合成了负载葡萄糖氧化酶(GOx)的DNA纳米花,通过静电吸附层
层自组装作用在该纳米花表面构建了包含蓝色荧光(PFP)和红色荧光(CdTe量子点)
的双发射荧光层,得到复合型多功能比率荧光探针。当加入含葡萄糖样品后,探针中
的GOx催化葡萄糖氧化产生HO,HO可进一步猝灭探针中CdTe量子点的红色荧光,
2222
而PFP的蓝色荧光保持不变,从而引起探针的荧光比率和颜色产生变化,实现对葡萄
糖的可视化分析。该方法中,检测葡萄糖的线性范围为0.80μM-80mM,由于该复合探
针将多个过程级联,大大提高了各级反应效率,因此该方法灵敏度明显高于目前已有
的葡萄糖检测方法。此外,方法特异性良好,并可用于人尿液中葡萄糖含量的测定。
二、以酶杂化DNA-钙纳米花为载体的比率荧光复合材料用于尿酸和葡萄糖的可视
化检测。采用盐老化方法合成了负载尿酸酶(UOx)的DNA钙纳米花,通过核酸染料
GelRed对纳米花中DNA的特异性染色作用,形成带有红色荧光的酶杂化DNA纳米花,
继而利用静电吸附作用在该纳米花表面组装带有绿色荧光的CdTe量子点,形成UOx杂
化的双发射荧光复合材料。加入尿酸后,复合材料中的UOx催化尿酸产生HO,继而
22
HO进一步使复合材料中CdTe量子点的绿色荧光猝灭但GelRed的红色荧光不受影响。
22
通过复合材料荧光比率和颜色的变化实现对尿酸的可视化分析。本方法检测尿酸的线
性范围为0.50μM-1.0mM,检出限0.17μΜ,跟目前已有的同类型方法相比,该方法灵
敏度较高。考察了方法的特异性以及方法在人尿液中尿酸含量的检测应用,均取得了
较为满意的结果。为了验证该复合材料的普适性,以同样的方法制备了负载GOx的
DNA纳米花并成功应用于葡萄糖的可视化检测,说明本论文基于多功能复合材料所构
建的可视化传感平台可拓展应用于多种酶反应相关过程,为酶相关疾病标志物的高灵
I
Ⅰ
敏度、可视化检测提供了新的思路。
关键词葡萄糖尿酸酶杂化DNA纳米花比率荧光可视化检测
II
Abstract
Diabetesandhyperuricemiaareprevalentdiseasesthatcanleadtoawiderangeof
complications,posingasignificantthreattohumanhealth.Therefore,accurateandrapid
determinationofglucoseanduricacidconcentrationsinbodilyfluidsisimperativeforthe
diagnosis,monitoring,andtreatmentofassociatedconditions.Herein,acomposite
multifunctionalmaterialintegratingenzymecatalyticactivityandr
原创力文档


文档评论(0)