《仪器分析》课件——6.3薄层色谱法操作技术.pptxVIP

薄层色谱法操作技术

薄层板

01

制版要求

吸附剂涂铺均匀

制板要求吸附剂涂铺均匀，表面光滑，没有划痕，没有气泡，洗净后不附水珠。

表面光滑无划痕

薄层板表面应光滑，无划痕，以确保实验结果的准确性。

无气泡

制板过程中需确保没有气泡，以避免影响薄层板的质量和实验结果。

薄层板分类

按支撑物质分类

薄层板按支撑物质分为玻璃板、塑料板、铝板等。

按固定相种类分类

按照固定相的种类，可以分为硅胶薄层板、键合硅胶板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。

按固定相粒径分类

按固定相粒径的大小，可以分为普通薄层板，高效薄层板。

市售与自制薄层板

市售薄层板种类

市售薄层板主要包括硅胶薄层板，硅胶GF254薄层板，聚酰胺薄膜、铝基片薄层板等。

自制薄层板种类

自制薄层板主要包括不加粘合剂的软板以及加了粘合剂的硬板。

硬板制备步骤

硬板的制备步骤主要包括载板的准备，匀浆的制备，涂板，活化。

硬板制备步骤

02

载板准备

载板材料选择

载板一般为玻璃板、塑料板和金属板，常用玻璃板。

载板尺寸与清洁

玻璃板大小根据操作需要而定，使用前需洗净烘干。

匀浆制备

匀浆成分

匀浆主要包括吸附剂和粘合剂，常用硅胶作为吸附剂。

粘合剂选择

粘合剂包括羧甲基纤维素钠和煅石膏，根据需要选用。

匀浆制备方法

将一份固定相和三份的水或0.5%~1%的羧甲基纤维素钠溶液混合研磨。

涂板与活化

涂板方法

涂板方法包括倾注法、平铺器、机械涂板法，机械涂板法操作简单。

涂板后处理

涂好的薄层板自然晾干或在105~110度加热0.5~1小时进行活化。

活化后的处理

活化后的薄层板冷却至室温后备用，可进行点样操作。

点样操作

03

溶液准备

01

用甲醇、乙醇、氯仿等挥发性有机溶剂配制样品溶液。

02

水溶性样品先用少量水溶解，再用甲醇或乙醇稀释定容。

03

避免用水溶解样品，因为水溶液斑点易扩散且不易挥发。

使用挥发性有机溶剂

水溶性样品处理

避免使用水作溶剂

点样方法

使用玻璃毛细管或微量注射器

用直径小于一毫米的玻璃毛细管或微量注射器吸入试样溶液进行点样。

点样位置与方式

点样前用铅笔在距薄层板0.5~1厘米处画基线，点样为圆点，直径2~4毫米。

分次多点点样

每次点样待溶剂挥发后再进行，点样时间不超过10分钟。

点样注意事项

01

点样时间过长会使吸附剂在空气中稀释而降低活性。

02

点样后可用吹风机吹干，以防止吸附剂活性降低。

避免吸附剂活性降低

点样后吹干

展开过程

04

展开容器要求

使用玻璃质展开缸

展开容器应为适合薄板大小的玻璃质薄层色谱展开缸，并有严密的盖子。

底部平整光滑

展开缸底部应平整光滑，或有双槽设计以保证展开过程的顺利进行。

展开方式与方法

盛行展开下行展开

展开的方式主要有盛行展开、下行展开、近水平展开等。

点样板放入展开缸

点好样的薄层板放入展开缸，进入展开剂的深度为距离基线0.5厘米为宜。

密闭展开

展开过程必须在密闭的展开容器中进行，一般情况下展开8~15厘米。

溶剂前沿标记

取出薄层板后标记溶剂前沿，溶剂挥散后进行显色解释。

显色与解释

05

显色方法

直接观察法

对于有色物质，直接在日光或灯光下进行观察。

荧光法

利用荧光物质在紫外灯下的暗斑或荧光斑点进行观察。

化学显色法

使用显色剂与被测物质产生颜色变化进行检视。

显色剂分类

通用型显色剂

包括碘、高锰酸钾溶液、硫酸乙醇溶液等。

专属型显色剂

包括茚三酮试剂、三氯化铁-铁氰化钾试剂等。

显色方式

喷雾显色

将显色剂呈均匀细雾状喷洒在薄层板上。

浸渍显色

将薄层板一端浸入显色剂中，待显色剂扩散后显色。

记录与保存

06

数据记录保存方式

图像或电子图形

薄层色谱图像一般可以采用摄像设备拍摄，以光学照片或电子图形的形式保存。

薄层色谱扫描仪

也可以用薄层色谱扫描仪或其他示意的方式来记录相应的色谱图。

THEEND

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