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酶制剂定向进化工程师岗位招聘考试试卷及答案

一、填空题（共10题，每题1分）

1.易错PCR中常用的诱变剂是______。

2.DNAshuffling的核心步骤是______和重组。

3.酶定向进化的两大核心策略是随机进化和______。

4.易错PCR的突变率通常控制在______个碱基/基因左右。

5.高通量筛选的关键是______和灵敏检测方法。

6.理性设计依赖酶的______和催化机制。

7.噬菌体展示常用的载体是______噬菌体。

8.酶改造策略分为随机、理性和______设计。

9.定向进化起始材料通常是______酶基因。

10.饱和突变常用方法是______（如重叠延伸PCR）。

二、单项选择题（共10题，每题2分）

1.易错PCR中Mn2+的作用是（）

A.提高酶保真度B.降低酶保真度C.促进引物结合D.稳定模板

2.DNAshuffling不需要的酶是（）

A.DNaseIB.Taq酶C.连接酶D.限制性内切酶

3.高通量筛选不常用的方法是（）

A.荧光检测B.比色检测C.质谱分析D.菌落显色

4.理性设计不包括的步骤是（）

A.结构解析B.突变位点预测C.随机文库构建D.活性验证

5.噬菌体展示的原理是（）

A.噬菌体表达酶B.酶与外壳蛋白融合C.噬菌体感染宿主D.噬菌体扩增基因

6.定向进化循环顺序正确的是（）

A.突变→筛选→重组→验证B.突变→重组→筛选→验证

C.重组→突变→筛选→验证D.突变→筛选→验证→重组

7.饱和突变不包括的方法是（）

A.重叠延伸PCRB.易错PCRC.定点饱和突变D.简并引物PCR

8.易错PCR的模板通常是（）

A.基因组DNAB.质粒DNAC.cDNAD.任意DNA

9.定向进化目的不包括（）

A.提高活性B.改变底物特异性C.降低稳定性D.提高热稳定性

10.筛选压力的作用是（）

A.增加突变数B.富集目标突变体C.提高突变率D.促进重组

三、多项选择题（共10题，每题2分）

1.定向进化策略包括（）

A.易错PCRB.DNAshufflingC.理性设计D.噬菌体展示

2.易错PCR影响因素包括（）

A.Mn2+浓度B.dNTP比例C.Taq酶用量D.循环次数

3.DNAshuffling步骤包括（）

A.片段化B.无引物PCRC.有引物PCRD.筛选

4.高通量筛选特点包括（）

A.快速B.微量C.灵敏D.低通量

5.理性设计前提是（）

A.结构已知B.催化机制明确C.突变位点可预测D.无需结构

6.噬菌体展示应用包括（）

A.酶进化B.抗体筛选C.蛋白相互作用D.基因克隆

7.酶改造技术包括（）

A.易错PCRB.定点突变C.噬菌体展示D.基因编辑

8.定向进化关键环节是（）

A.文库构建B.高通量筛选C.活性验证D.理性设计

9.饱和突变优势是（）

A.覆盖所有氨基酸突变B.针对特定位点C.突变率高D.无需结构

10.定向进化与理性设计区别是（）

A.是否依赖结构B.是否随机突变C.筛选必要性D.靶点数量

四、判断题（共10题，每题2分）

1.易错PCR只能引入随机突变，不能定向改造。（）

2.DNAshuffling是非随机重组策略。（）

3.高通量筛选无需预筛选，直接筛所有突变体。（）

4.理性设计依赖酶结构和催化机制。（）

5.噬菌体展示可进化酶的亲和力和活性。（）

6.定向进化每轮需筛选和验证。（）

7.饱和突变可覆盖目标位点20种氨基酸突变。（）

8.易错PCR突变率越高，效率越高。（）

9.DNAshuffling可重组不同来源基因。（）

10.定向进化只能改酶活性，不能改其他性质。（）

五、简答题（共4题，每题5分）

1.简述易错PCR的原理及应用。

2.定向进化与理性设计的主要区别是什么？

3.高通量筛选在酶定向进化中的作用及关键要求？

4.简述DNAshuffling的基本流程。

六、讨论题（共2题，每题5分）

1.如何从策略、文库构建、筛选三方面提高定向进化效率？

2.结合工业酶应用（如洗涤剂酶、生物燃料酶），谈谈定向进化的价值。

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答案部分

一、填空题答案

1.Mn2+（锰离子）

2.片段化

3.理性设计

4.1-5

5.微型化（自动化操作）

6.三维结构

7.M13（丝状）

8.半理性

9.野生型

10.重叠延伸PCR（简并引物PCR）

二、单项选择题答案

1.B2.D3.C4.C5.B6.B7.B8.B9.C10.B

三、多项选择题答案

1.ABD2.ABCD3.ABCD4.ABC5.ABC6.ABC7.ABCD8.ABC9.AB10.ABC

四、判断题答案

1.×2.×3.×4.√5.√6.√7.√8.×9.√10.×

五、简答题答案

1.原理：通过调整PCR条件（加Mn2+、改变dNTP比例）降低Taq酶保真度，使