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生物合成药物中间体研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

一、填空题（共10题，每题1分）

1.生产青霉素中间体6-APA的关键酶是______。

2.生物合成紫杉醇中间体10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的常用宿主是______。

3.检测生物合成中间体中糖基含量的常用方法是______。

4.目的基因与载体连接的关键酶是______。

5.L-苯丙氨酸中间体的合成途径是______。

6.发酵控制溶解氧的方式除搅拌、通气外，还可______。

7.分离小分子中间体的常用色谱技术是______。

8.洛伐他汀中间体的关键前体是______。

9.前体物质添加需遵循______原则（举1例）。

10.表达载体中启动子的作用是______。

二、单项选择题（共10题，每题2分）

1.生物合成维生素B12中间体的常用微生物是？

A.大肠杆菌B.丙酸杆菌C.枯草芽孢杆菌D.假单胞菌

2.发酵pH控制的常用方式是？

A.补碳源B.补酸/碱C.补氮源D.变温度

3.属于次级代谢产物中间体的是？

A.葡萄糖B.6-APAC.氨基酸D.ATP

4.检测目的蛋白表达量的常用方法是？

A.电泳B.ELISAC.比色法D.滴定法

5.红霉素中间体合成的关键酶是？

A.PKSB.NRPSC.糖苷转移酶D.羟化酶

6.碳源的作用不包括？

A.供能B.碳骨架C.调节pHD.前体

7.离子交换树脂选择依据是中间体的？

A.分子量B.电荷性质C.溶解度D.挥发性

8.紫杉醇中间体的前体物质是？

A.苯丙氨酸B.异戊二烯C.亮氨酸D.丙氨酸

9.载体选择无需考虑的是？

A.宿主兼容性B.标记基因C.价格D.启动子强度

10.代谢流分析的主要目的是？

A.提高中间体产量B.降成本C.优化培养基D.测菌体浓度

三、多项选择题（共10题，每题2分）

1.生物合成中间体的常用宿主有？

A.大肠杆菌B.酵母菌C.放线菌D.植物细胞

2.影响中间体产量的因素包括？

A.温度B.pHC.溶氧D.前体添加量

3.检测中间体的常用仪器有？

A.HPLCB.GC-MSC.NMRD.紫外分光光度计

4.基因工程菌构建步骤包括？

A.目的基因克隆B.载体构建C.转化D.筛选

5.他汀类中间体的合成途径有？

A.MVAB.MEVC.莽草酸D.糖酵解

6.代谢调控方法有？

A.关键酶过表达B.反馈抑制解除C.前体定向供给D.变溶氧

7.分离纯化方法有？

A.萃取B.结晶C.色谱D.离心

8.抗生素中间体包括？

A.6-APAB.7-ACAC.10-去乙酰巴卡亭ⅢD.洛伐他汀中间体

9.培养基灭菌方法有？

A.湿热灭菌B.干热灭菌C.过滤灭菌D.紫外线灭菌

10.常用标记基因有？

A.氨苄抗性B.卡那抗性C.荧光蛋白D.启动子

四、判断题（共10题，每题2分）

1.生物合成比化学合成更环保。（）

2.大肠杆菌可直接合成复杂次级代谢中间体。（）

3.前体添加越多，产量越高。（）

4.HPLC可用于中间体分离纯化。（）

5.基因克隆无需考虑密码子偏好性。（）

6.搅拌转速越高，溶氧越高。（）

7.莽草酸途径合成芳香族氨基酸。（）

8.PKS参与红霉素中间体合成。（）

9.植物细胞可合成紫杉醇中间体。（）

10.ELISA可检测目的蛋白表达量。（）

五、简答题（共4题，每题5分）

1.简述生物合成中间体的优势。

2.简述目的基因克隆的基本步骤。

3.简述发酵溶氧的控制策略。

4.简述中间体分离纯化的基本原则。

六、讨论题（共2题，每题5分）

1.如何从代谢调控和工艺优化两方面提高中间体产量？

2.如何解决重组菌的代谢负荷问题？

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参考答案

一、填空题

1.青霉素酰化酶

2.红豆杉内生真菌

3.苯酚-硫酸法

4.DNA连接酶

5.莽草酸途径

6.分批补料

7.高效液相色谱（HPLC）

8.甲羟戊酸（MVA）

9.低浓度分批添加（或无毒性）

10.驱动目的基因转录

二、单项选择题

1-5:BBBBA

6-10:CBCDA

三、多项选择题

1-5:ABCDABCDABCDABCDAB

6-10:ABCABCDABABCABC

四、判断题

1.√2.×3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.√10.√

五、简答题

1.生物合成优势：①环保：常温常压、无有毒副产物；②特异性：酶催化立体选择性高，避免消旋体；③经济：复杂中间体（如6-APA）合成步骤简化；④可持续：利用可再生原料，规模化生产。

2.克隆步骤：①提取供体DNA/cDNA；②PCR扩增目的基因；③双酶切目的基因与载体；④DNA连接构建重组质粒；⑤转化感受态菌；⑥筛选阳性克隆。

3.溶氧控制：①基础调控：调搅拌转速、通气量；②补料：分批补碳源/前体；③在线监测：设阈值自动调节；④代谢优化：过表达呼吸链基因；⑤消泡：加消泡剂减少泡沫影响。

4.纯化原则：①目标