CN110243648B 一种采用改良加藤厚涂片制作血吸虫卵标本的方法 （四川省疾病预防控制中心）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN110243648B

(45)授权公告日2020.06.02

(21)申请号201910623065.4

(22)申请日2019.07.11

(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN110243648A

(43)申请公布日2019.09.17

(73)专利权人四川省疾病预防控制中心

地址610000四川省成都市武侯区中学路6

号

专利权人丹棱县疾病预防控制中心

(72)发明人吴子松陈陵李荣智杨羽毛勇徐亮姚琴蒙先洪范建儒唐猛刘阳钟波

(74)专利代理机构北京天盾知识产权代理有限公司11421

(51)Int.CI.

GO1N1/28(2006.01)

(56)对比文件

CN103868774A,2014.06.18,

CN108715610A,2018.10.30,

张树屏等.改进改良加藤厚涂片法诊断血吸虫病的研究.《中国血吸虫病防治杂志》.1999,第11卷(第1期),

张树屏等.改进改良加藤厚涂片法诊断血吸虫病的研究.《中国血吸虫病防治杂志》.1999,第11卷(第1期),

钟政荣等.高纯度日本血吸虫卵的分离及活性鉴定.《中国人兽共患病学报》.2012,第28卷(第3期),

审查员胡慧

代理人葛宏

权利要求书1页说明书4页

(54)发明名称

一种采用改良加藤厚涂片制作血吸虫卵标本的方法

(57)摘要

CN110243648B本发明涉及到一种采用改良加藤厚涂片制作血吸虫卵标本的方法，由以下步骤构成：取无寄生虫感染人粪便，利用100目/时尼龙绢刮取细粪渣，再将血吸虫卵50-500个加入细粪渣中并搅拌均匀；将改良加藤厚涂片定量板放在载玻片上，将有血吸虫卵的细粪渣填满定量板的定量小孔，移去定量板，小孔中的细粪渣留置在载玻片，然后在载玻片上覆盖透明玻璃纸，最后挤压细粪渣扩散展平；获得改良加藤厚涂片标本。本发明在制作改良加藤厚涂片血吸虫卵标本过程中，避免刮片了对血吸虫卵的挤压与尼龙绢过滤对血吸虫卵的挤压，从而能保持标本内虫卵的完整形

CN110243648B

CN110243648B权利要求书1/1页

2

1.一种采用改良加藤厚涂片制作血吸虫卵标本的方法，由以下步骤构成：

(1)、获取血吸虫卵、备用；

(2)、取无寄生虫感染人粪便，选取含纤维粗渣较少、粪质细腻的粪便，对粪便进行处理；

(3)、通过100目/时尼龙绢，刮取细粪渣；

(4)、取血吸虫卵50-500个，加入细粪渣中，搅拌均匀；

(5)、取载玻片，上置改良加藤厚涂片定量板，取加入血吸虫卵的细粪渣填满定量板的定量小孔；

(6)、移去定量板，小孔中的细粪渣留置在载玻片；

(7)、在载玻片上覆盖透明玻璃纸；

(8)、通过透明玻璃纸挤压细粪渣，使细粪渣在透明玻璃纸与载玻片之间扩散展平；获得改良加藤厚涂片标本；

(9)、将改良加藤厚涂片标本20-25℃室温存放24h以上；

(10)、将改良加藤厚涂片标本通过显微镜全片观察，计数虫卵，获得该涂片标本的标准虫卵数；

在步骤(2)中，所述对粪便进行处理的具体过程为：

将粪便加入体积10倍以上的纯水中，搅散，并采用50目/时过滤网过滤，将过滤液沉淀，取沉淀物，并将沉淀物采用40-50℃烘干至5%以下含水量，得脱水粪渣，并将脱水粪渣在干燥环境下存放5天以上；

向脱水粪渣中加入纯水，使含水量达到70-100%。

2.如权利要求1所述的一种采用改良加藤厚涂片制作血吸虫卵标本的方法，其特征在于，步骤(1)的具体过程为：取感染血吸虫尾蚴的家兔肝脏，并去掉结缔组织和血管，然后分成若干小块组织；将小块组织倒入高速组织捣碎机中加冰盐水捣碎3次，每次2min,间隔2min,捣碎后通过40、60、80、120目/时分样筛，加入低于3℃的生理盐水淘洗，然后放置于冰箱中自然沉淀；去掉上清夜后，沉淀物进行离心分离，收集得到纯净的血吸虫卵；将血吸虫卵以1.2%生理盐水冰箱冷藏保存备用。

3.如权利要求1所述的一种采用改良加藤厚涂片制作血吸虫卵标本的方法，其特征在于，使细粪渣在透明玻璃纸与载玻片之间扩散展平；具体为：使细粪渣扩散展平至距离载玻片边缘2mm处。

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