CN1852972A 用于对在细胞薄片制作中使用的支撑体进行涂敷的组合物、细胞薄片制作用支撑体以及细胞薄片的制造方法 （学校法人庆应义塾）.docxVIP

[19]中华人民共和国国家知识产权局[51]Int.Cl.

C12N5/00(2006.01)

[12]发明专利申请公开说明书

[21]申请号200480027024.0

[43]公开日2006年10月25日[11]公开号CN1852972A

[22]申请日2004.3.25

[21]申请号200480027024.0

[30]优先权

[32]2003.9.19[33]JP[31]328340/2003

[86]国际申请PCT/JP2004/0041612004.3.25

[87]国际公布WO2005/028638日2005.3.31

[85]进入国家阶段日期2006.3.20

[71]申请人学校法人庆应义塾地址日本东京都

[72]发明人福田惠一板桥裕史坪田一男

[74]专利代理机构中科专利商标代理有限责任公司代理人朱丹

权利要求书1页说明书23页附图15页

[54]发明名称

用于对在细胞薄片制作中使用的支撑体进行涂敷的组合物、细胞薄片制作用支撑体以及细胞薄片的制造方法

[57]摘要

本发明提供一种细胞薄片的制造方法，它包括：在表面被涂敷纤维蛋白的支撑体的表面上培养细胞直至细胞达到饱和状态，继续培养一段充分的时间以使细胞底面的纤维蛋白被分解，然后将培养的细胞从支撑体表面剥离成薄片状。进而，本发明还提供一种表面被纤维蛋白涂敷的细胞薄片制作用支撑体。本发明还提供一种上述组合物，是用于对在细胞薄片制作中使用的支撑体的表面进行涂敷的组合物，其中的支撑体用于制作细胞薄片，其特征在于，含有纤维蛋白原和凝血酶。可以使用由市售的且被确保安全性的熟悉的材料涂敷的支撑体，通过简单的操作制造细胞薄片。

200480027024.0权利要求书第1/1页

2

1.一种组合物，是用于对在细胞薄片制作中使用的支撑体的表面进

5行涂敷的组合物，其中，

含有纤维蛋白原和凝血酶。

2.一种细胞薄片制作用支撑体，其中，表面被纤维蛋白所涂敷。

3.一种细胞薄片的制造方法，其中，包括：

10在表面被纤维蛋白涂敷的支撑体的表面上将细胞培养到成为饱和状态，继续培养充分时间直至细胞底面的纤维蛋白被分解，然后从支撑体表面将培养的细胞剥离成薄片状。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，

包括进一步层叠化已剥离成薄片状的培养细胞。

155.根据权利要求3或4所述的方法，其中，

细胞薄片被用于再生医疗或药剂的生物学活性试验。

200480027024.0说明书第1/23页

3

5

用于对在细胞薄片制作中使用的支撑体进行涂敷的组合物、细胞薄片制作用支撑体以及细胞薄片的制造方法

技术领域

本发明涉及一种用于对在细胞薄片制作中使用的支撑体进行涂敷的组合物、细胞薄片制作用支撑体以及细胞薄片的制造方法。

10

背景技术

对于已进入明显功能不全的心脏而言，作为代替供体不足的心脏移植的治疗方法，正在尝试利用各种干细胞的细胞移植。近年来，在从这样的细胞移植开始在体外立体构建心肌组织的基础上进行移植的组织移植的

15

方法正在盛行。例如，早已有报道：已成功地通过使用用电子射线将聚(N一异丙基丙烯酰胺)(简称为“PIAAm”)涂布于市售的聚苯乙烯培养皿表面而成的温度敏感性培养皿，制作各种细胞薄片，其中，对于心肌细胞，开发出了通过层叠化这样制作出的心肌薄片而可以作为移植片利用的心肌组织块(特开2003—38170号公报，国际公开01/068799号手册，Shimizu

20

et.Al.:Fabricationofpulsatilecardiactissuegraftsusinganovel3-dimensionalcellsheetmanipulationtechniqueandtemperature-responsivecellculturesurface:CircRes.1002;90:e40-e48)。这样制作的心肌组织块在体内和体外均被确认为进行