溴酚蓝光度法测马来酸罗格列酮的含量.docVIP

【标题】溴酚蓝光度法测马来酸罗格列酮的含量 【作者】宁志华 【关键词】溴酚蓝??分光光度法??马来酸罗格列酮 【指导老师】秦宗会 【专业】化学 【正文】1引言马来酸罗格列酮是第二代噻唑烷二酮降血糖新药，是一种有效的胰岛素增敏剂，该药物在临床上用于Ⅱ型糖尿病(非胰岛素依赖性糖尿病)的治疗[1]。与其他同类药物相比，该药物具有药效作用强，肝脏副作用小和生物利用度高的优点[2]，真正有效的降低高胰岛素血症和血浆游离脂肪酸水平[3,4]，保护胰腺β?细胞，降低胰岛细胞的功能衰竭及低血糖的危险[3,5]，实现对Ⅱ型糖尿病的全面控制。临床试验显示，常见的不良反应主要有：①体重增加。②头痛③上呼吸道感染④血脂紊乱少见的不良反应有：①水肿?②贫血?③肝毒性?④心力衰竭?⑤低血糖[6]。目前，文献报道的马来酸罗格列酮的分析方法主要有高效液相色谱法[7，8，9，10]、反相高效液相色谱法[11，12]、紫外分光光度法[13]、核磁共振谱分析[14，15]等。高效液相色谱法、反相高效液相色谱法具有分析速度快、分离效率高、灵敏度高和操作自动化等优点，但是由于其仪器设备昂贵，柱填料和流动相价格高，因此它的普及受到一定的限制。紫外分光光度法方法操作简便、迅速、不需要复杂和昂贵的设备，不消耗样品，测定后仍能回收使用，低浓度的盐和大多数缓冲溶液不干扰测定，但该方法准确度和灵敏度差一点以及干扰物质多。核磁共振谱分析是化学领域中非常重要的一种分析方法，耗时短、工作稳定度高、噪音低、等优点，但其振荡频率的稳定性较差，噪音电平较高，而且设备昂贵，不能广泛的应用。现有方法在实际工作中常常因为仪贵等等多种因素，不能广泛的应用于各领域，而分光光度法操作比较简单、灵敏度较高、线形范围宽能够广泛应用。研究发现一定浓度的马来酸罗格列酮与染料溴酚蓝在pH为4.52的酸性溶液中，在最大吸收波长434 nm、最大褪色波长590 nm处，浓度与吸光度成良好的线性关系，从而建立测定马来酸罗格列酮的光度分析法，方法具有较高的灵敏度和良好的选择性，结果令人满意。2?实验部分2.1主要仪器与药品UV-3100型紫外分光光度计（日立公司）；T6新悦可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；Seveneasy型实验室酸度计（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；EL 104电子天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）。马来酸罗格列酮（RMT,?含量99%，成都宇洋高科技发展有限公司）；溴酚蓝（BPB，天津市化学试剂研究所）。实验其他所用试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。马来酸罗格列酮标准溶液1×10-4 moL/L：称取一定量的RMT，用0.1 moL/L的盐酸溶解并定容，配成浓度为10-4 moL/L的标准溶液。溴酚蓝溶液：称取一定量的溴酚蓝，用乙醇溶解，配置成浓度为10-3 moL/L的溶液，使用时用二次蒸馏水稀释成浓度为5×10-4 moL/LB-R缓冲溶液：由混酸（0.04 moL/L醋酸、0.04 moL/L磷酸、0.04 moL/L硼酸）以及0.20 moL/L的NaOH以不同的比例配成一系列不同pH值的缓冲溶液，并用pH酸度计进行校准。2.2实验方法取1.0 mL RMT标准溶液10-4moL/L于10 mL比色管中，加入5×10-5 moL/L?的BPB溶液2.0 mL，以及pH值为4.52缓冲溶液0.6 mL，用二次蒸馏水稀释至刻度，摇匀后，以水做参比，用1 cm比色皿在590 nm、434 nm波长处直接测量吸光度。3结果与讨论3.1?吸收光谱图按实验方法，以水做参比，在UV-3100型紫外分光光度计上分别对各体系在波长为250~700 nm内进行扫描，得吸收光谱见图1。结果表明：以水做参比时，马来酸罗格列酮在可见光区无吸收，显色剂BPB在590 nm、434 nm处有吸收峰，其中在590 nm处吸收峰最大，在BPB中加入RMT后，因形成了离子络物，使溶液颜色降低，吸光度降低，最大吸收峰仍保持在590 nm处。以试剂做参比时，最大吸收波长在434 nm处，同时在590 nm形成负吸收，且在两波长处，线性关系良好，用于马来酸罗格列酮含量的测定。故本实验选择434 nm、590 nm作为测定波长。3.2?缓冲溶液的影响3.2.1?缓冲溶液pH取一系列不同pH的B-R溶液1 mL，RMT标准品2 mL，BPB溶液2 mL，用水定容成10 mL后直接进行吸光度的测定，见图2。结果发现，波长为434 nm时，体系吸光度在pH为4.15~4.66处变化平缓，而波长为590nm时，吸光度在pH为4.5附近变化明显，故本实验选用pH为4.52的缓冲体系。3.2.2缓冲溶液的用量通过固定浓度为5×10-4 mo