绿色荧光蛋白在植物细胞生物学中的应用.pdfVIP

—528 — 《生命的化学》2001 年 21 卷 6 期 ( ) ( ) 文章编号 2001 本文参加中华基因网第二届“生命之光”征文活动 　　 绿色荧光蛋白在植物细胞生物学中的应用 1 1 ,2 1 ,2 1 1 鞠传丽 　王 　东 　孔冬冬 　胡 　勇 　何奕昆 ( 1 首都师范大学生物系 ,北京 100037 ;2 中国科学院植物所,北京 100093 ) 　　关键词 :绿色荧光蛋白 ; GFP 融合蛋白 中图分类号:Q51 ;Q26 ( 　　克隆于海洋动物水母 Ae quorea victori 运动和大分子的运输等研究中 , GFP 也可用 ) ( a 的绿色荧光蛋白 green fluorescent protein , 于标记特异类型的细胞 ,跟踪细胞信号转导 GFP) 作为一种新型的非酶性报告基因具有 事件等。 检测简便 ,结果真实可靠 ,不需要任何外源底 1 . 用于植物细胞骨架研究 物或辅助因子的特点 , 自出现以来它已引起 以往研究植物细胞骨架通常是采用化学 ( 人们的广泛兴趣 , 目前已经应用于烟草、柑 染料标记的方法 ,即将荧光标记蛋白 如罗丹 ) 橘、拟南芥、玉米、水稻、大豆、苜蓿等多种植 明微管蛋白 显微注射到细胞 ,然后用荧光 物材料的研究中。 或共聚焦显微镜对其进行监测 ,这样就可以 GFP 含有特殊的六肽生色团结构 ,用蓝 观测到植物细胞皮层和纺锤体微管细胞骨架 紫光激发即能发出肉眼清晰可见的绿色荧 的动态行为。肌动蛋白细胞骨架的研究也采 光 ,而无需任何底物或辅助因子。GFP 能与 用了相似的方法。但是要将标记蛋白注射到 多种不同蛋白质的 N 端或 C 端融合而保持 细胞内部 ,尤其是具有细胞壁的植物细胞 ,需 与天然蛋白质相似的荧光特性 , 因而可作为 要较长的操作时间 ,并有一定的技术要求 ,而 一种直观性很强的遗传标记物。随着 GFP 且只适于分离或暴露的单细胞 ;另外 ,显微注 应用的普及 , 已发展出了各种形式的 GFP 突 射对细胞本身来说是一种侵害性行为 ,会干 变体 ,这些突变体在荧光强度、光谱特性、稳 扰细胞正常的功能。 定性和溶解性上均有不同程度的改变 ,从而 而应用 GFP 在很大程度上可以克服以 可适用于不同的研究目的。GFP 为植物细胞 上缺点和局限性。Marc 等[1 ] 将 GFP 与微管 生物学的发展开创了新的领域。目前 ,GFP 融