“基因工程”考点分析.pdf.pdfVIP

一 ～ ～ w 生物 ·考点聚焦 ，～一 ／ “ 墓蘑 疆 ’’。考 口 杨 军 随着人类逐渐认识了基因的结构与组 重要的任务。限制酶的选择应当遵循以下一 成、基因的操作工具限制酶与连接酶，掌握了 些原则 ：不破坏 目的基因；不破坏标记基因； 基因的体 内复制和体外扩增(PCR)的规律， 目的基因和运载体上都有限制酶的切割位 拥有了DNA分离的技术，基因工程作为一门 点。当然也要注意用一种限制酶和两种限制 新技术应运而生。基因工程这种新的现代生 酶切割的区别。 物技术也是近年高考的重点、难点和落脚点。 例2 与只使用EcoRI相比较，使 笔者根据课标要求，结合考纲和近年高 用BamH I和HindⅢ两种限制酶同时处理质 考考点将近年基因工程考点总结如下。 ■■0 粒、外源DNA的优点在于可以防止— — 一 、 基因工程的基础知识 基因工程的理论铺垫—— 子生物学发展： 限制酶 BamHI HindⅢ EcoRI SmaI ① 艾弗里证明了DNA是遗传物质。 ② 沃森和克里克I证明了DN 噪菔兰构 。 识别序列及 GGATCCAAGCTTGAATTCCCCGGG 切割位点 CCTAGGTTCGAACTrAAGGGGCCC ③ 尼仑贝格破译了遗传密码。 = 二、酶切 Eco RI RI 基因 Eco 基因工程选择限制性内切酶作为工具， ． ． 主要是因为它具有比一般酶更高的专一性。 由于其具有较高的专一性，因此在基因工程 BamHI Hindm 的具体操作中如何选择限制性内切酶是高考 图1 的重点考察内容。 =矗 务 1．限制酶的特异性 答案 质粒和含 目的基因的外源 “喈， 例1 判断用限制性核酸 内切酶 DNA片段 自身环化 切割烟草花叶病毒的核酸是否可行?— — 。 坳 解析 基因工程中目的基因和质 ； 121豢 答案 不可行 粒可以用同一种酶切，也可以用两种酶切，若 用一种酶切 ，质粒只要切一个切 口，目的基因 多解析 限制酶的专一性非常强，其 需要切两个切 口；若用两种酶切，质粒要切两 特异性表现在三个方面：识~I]DNA、识别特定 个切 口，目的基因也需要切两个切 口。一种酶 序列(回文)、切割特定位点磷酸二酯键。由于 切出的4个切 口都相同，所以有多种连法，两 烟草花叶病毒是RNA病毒，所以限制酶不能 种酶切出的质粒和 目的基因上的4个切 口两 识SJlRNA。 两相同，因此可以防止 自身环化。 另外要特别注意限制酶切割以后的结 ， 、 3．同尾酶 果，磷酸二酯键断裂，暴露出新的磷酸基团。 — 限