枯草芽孢杆菌核黄素操纵子rib operon的克隆与表达.pdfVIP

2011年 21(5) 生 物 技 术 列分析 [J]．吉林大学学报：理学版，2009，47(4)：846—851． 与原核表达研究[J]．安徽农业科学，2007，35(2)：330—332，335． [28]彭扣，陈伟伟 ，胡炜，等 ．泥鳅肌肉生长抑制素基因片断的克隆及 [30]杜启艳，南平，燕帅国，等．两种泥鳅芳香化酶基因的克隆与时空 其表达 [J]．水产学报，2007，31(2)：145—151． 表达[J]．水生生物学报，2006，30(3)：276—283． [29]杜启艳，陈丽丽，南平，等 ．2种泥鳅生长激素基因cDNA的克隆 枯草芽孢杆菌核黄素操纵子 riboperon的克隆与表达 张西锋。，王丽梅 ，刘梁 ，李万芬 (1．武汉工业学院 生物与制药工程学院，湖北 武汉430023； 2．武汉星辰现代生物工程有限公司，湖北 武汉430074) 摘要：目的：构建产核黄素的枯草芽孢杆菌基 因工程菌。方法：以穿梭载体 pEB03构建核黄素操纵子的表达质粒载体 pGJB13和pGJB14，与质粒pMX45分别转化产核黄素的枯草芽孢杆菌 GJ07，并通过发酵摇瓶实验检测核黄素的产量。结果：得 到产核黄素的工程菌GJ13、GJ14和GJ08，在以蔗糖为碳源的发酵条件下，GJ08可产核黄素820mg／L，提高了约55％。结论 ：得到 了产核黄素的高产菌种GJ08。 关键词：核黄素；枯草芽孢杆菌；操纵子 中图分类号：Q786；$852．61 文献标识码：A doi：10．3969／j．issn．1004—311X．2011．05．115 CloningandExpressionofBacillussubtilisriboflavinoperon ZHANG Xi—feng 。WANG Li—mei．LIU Liang ，LIWan—fen (1．CollegeofBiologicalandPharmaceuticalEngineering，WuhanPolytechnicUniversity，Wuhan430023； 2．WuhanStarsModemBio—engineeringCo．Ltd,Wuhan430074，China) Abstract：0bjecfive：ConstructionofengineeringB．subtilisproducingriboflavin．Method：riboflavinoperonexpressionvectorpGJB13 andpGJB14wereconstructedusingpEB03，aE．coli—B．subtilisshuttlevector．PlasmidspGJB13，pGJB14andpMX45weretransformed intoB．subtilisGJ07toenhanceriboflavinproductionusingshakeflask．Result：GotengineeringB．subtilisGJ13，GJ14andGJ08．WithSU— croseascarbon source．riboflavin production from GJ08 wasabout820mg／L and 55％ higherthan thatrfom the GJ07 in 60 hours．Conclusion：Got subtilisGJ08forproducingriboflavin． Keywords：riboflavin；Bacillussubtilis；operon 核黄素 (riboflavin)是人体所必需的一种水溶性维生素，是 Spec，Tet，ribO，Dc)，质粒pMX45(带有3．9kb的核黄素操 维持机体正常生理代谢所必需的营养物质，是机体内许多酶 纵子 ，Em)，Ecoli—B．subtilis穿梭载体pEB03(Cm ，Spec)J 系统的重