反相高效液相色谱衍生化法测定氨基葡萄糖原料及其制剂的含量.pdfVIP

维普资讯 医药导报 2008年7月第 27卷第7期 ·851· 反相高效液相色谱衍生化法测定 氨基葡萄糖原料及其制剂的含量 王英瑛 ，李 俊 ，曾 苏 (1．浙江大学药学院，杭州 310030；2．浙江省台州市药品检验所，318000) [摘 要] 目的 建立反相高效液相色谱衍生化法测定氨基葡萄糖盐酸盐和氨基葡萄糖硫酸盐及其制剂含量的 方法。方法 在三乙胺存在的碱性条件下，氨基葡萄糖溶液 中加入芴 甲氧羰酰琥珀酰亚胺 (FMOC—OSu)进行衍生化反 应，采用岛津Shim-packVP—ODSC 色谱柱 (250mm×4．6mm，5txm)，乙腈一磷酸盐缓冲液 (pH值2．5)(40：60)为流动 相，梯度洗脱，流速 1．0mL·min～，检测波长：265nm，对衍生化反应备件进行考察。结果 最适宜的衍生化反应条件 为：FMOC．0Su溶液、三 乙胺溶液浓度分别为0．4％，0．2％，水浴温度为60℃，反应时间为 30min；氨基葡萄糖的线性范 围为0．4～3．0mg．mL～，4个样品的平均回收率分别为 100．1％，100．3％，99．3％，99．9％。结论 该方法简便准确，专 属性、重复性好，可用于氨基葡萄糖及其制剂的质量控制。 [关键词] 氨基葡萄糖；色谱法，高效液相 ，反相；衍生化法 [中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1004-0781(2008)07-0851-02 氨基葡萄糖 (2一氨基一2一脱氧一D一葡萄糖 ，简称 GA)与人体关 265nm，流动相为梯度浓度：A一乙腈，B一磷酸盐缓冲液 (pH值 = 系密切，广泛存在于人体 内，可以减少血浆 中一氧化氮 、前列腺 2．5)，比例为40：60。梯度洗脱程序如下：0～4min，A ：B为 素E，等的生成 ，抑制血小板的聚集，但都以结合型存在而无游 40：60；～9min，A ：B为 90：10；接着等度洗脱 1min；～ 离型，主要以3种方式存在 ：氨基葡萄糖盐酸盐 、氨基葡糖糖硫 14min，A ：B为40：60。 酸盐和N一乙酰氨基葡萄糖 。氨基葡萄糖是关节滑液、软骨基 2．2 溶液配制 对照品溶液：精密称取氨基葡萄糖盐酸盐对 质等器官组织的组成原料 ，具有抗炎和保护、营养关节和软骨 照品20mg于 10mL容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度。供试品 的作用，已作为保健食品应用于人群 ，还可应用于食品、化 溶液：氨基葡萄糖盐酸盐 ，氨基葡萄糖硫酸钾盐，氨基葡萄糖盐 妆品和饲料添加剂中，用途相当广泛。因此建立氨基葡萄糖含 酸盐片剂，氨基葡萄糖硫酸钠盐胶囊适量，加水超声溶解 ，定容 量的检测方法，控制这类药品和保健食品的质量很有必要。已 至刻度，片剂和胶囊溶液用滤纸过滤后，取续滤液备用。 报道的氨基葡萄糖测定方法有滴定分析法 、比色法 “和高 2．3 衍生化反应条件的选择 效液相色谱 (HPLC)法 。笔者采用衍生化方法，通过在氨基 2．3．1 衍生化反应步骤 精密量取对照品溶液或样品溶液 葡萄糖溶液中加入芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺衍生化反应生成衍 1．0mL置 50mL容量瓶 中，加入 0．2％三乙胺溶液 1mL和 生物后经反相高效液相色谱 (RP—HPLC)法测定氨基葡萄糖含 0．4％的FMOC—OSu乙腈溶液 5mL，摇匀，置 60℃水浴中加热 量 ，方法简便，结果准确可靠。 30min，再立即加入冷的乙腈一磷酸盐缓冲液 (40：60)的流动相 1 仪器与试药 使反应停止 ，并稀释至刻度 ，摇匀，用孔径0．45 m微孔滤膜过 1．1 仪器 WatersAllianc