应用IMS—RT—PCR方法检测番茄黑环病毒.pdfVIP

第 29卷第 4期 上 海 交通 大 学 学报 (农 业 科 学版) Vo1．29No．4 2011年 8月 JOURNALOFSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY(AGRICULTURALSCIENCE) Aug．2011 文章编号 ：1671—9964(2011)04—0021 DOI：10．3969／J．ISSN2011．04．005 应用 IMS—RT—PCR方法检测番茄黑环病毒 崔学慧 ，陈舜胜 ，胡亚萍 ，于 翠。，杨翠云。 (1．上海海洋大学，上海 201306；2．上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201201； 3．上海出入境检验检疫局，上海 200135) 摘 要：以番茄黑环病毒为研究对象，用免疫磁珠分离(Immunomagneticseparation，IMS)结合 RT-PCR方法，建立了检测番茄黑环病毒的IMS-RT-PCR方法。结果表明，该方法能够检测到较 低浓度的病毒，灵敏度比普通RT-PCR的灵敏度高出1O倍。 关键词：IM1S-RT-PCR；番茄黑环病毒；检测 中图分类号 ：$436．412 文献标识码 ：A DetectionofTomatoBlackRingVirusby Immunomagnetic SeparationandRT—PCR CUIXue—hui ，CHEN Shun—sheng ，H U Ya—ping。，YU Cui。，YANG Cui—yun。 (1．ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306 ，China~2．ShanghaiPudongNewAreaAgriculturalTechnologyExtension Center，Shanghai201201，China 3．ShanghaiEntryEixtInspectionandQuarantineBureau，Shanghai200135，China) Abstract~A high sensitivitymethodfordetecting TomatoBlack RingVirus(TBRV)wasdeveloped by immunomagnetiCseparationandreversetranscriptase—polymerasechainreaction(IMS-RT-PCR)．Results showedthatthe,．sensitivityofIMS-RT-PCR fordetectingTBRV wasten timeshigherthan thatofthe traditionalRT—fCR． Keywords：IM S-RT-PCR TomatoBlackRingVirus；detection 番茄黑环病毒 (Tomatoblackringnepovirus， 和为害的严重性，所 以2007年在新修订的进境植物 TBRV)隶属豇豆花叶病毒科 (Comoviridae)线虫传 检疫名录中将番茄黑环病毒明确规定禁止入境的检 多面体病毒属 (Nepovirus)。该病毒寄主范围广、 疫性病毒 。 传播途径多、适生性强。能够侵染包括农作物、蔬菜 我国进境植物繁殖材料的国际贸易 日益频繁， 和花卉等多种植物，如为害番茄产生黑环，侵染菜 不可避免增加了这种检疫性病毒传人我国的可能 豆、甜菜、莴苣、悬钩子等引起环斑，为害芹菜产生黄 性，对我国的农业、林业和蔬菜花卉业等生产造成了 脉，导致马铃薯出现 “花束和假珊瑚状”，侵染桃树而 极大的威胁，所 以必须加强进境种苗的检疫措施 ，防 使新枝出现矮缩等症状。番茄黑环病毒可以种传， 止番茄黑环病毒随进 口种苗传人我 国。 也还可以通过种子 、土壤和植物繁殖材料 随运输过 由于分子生物学检测方法具有快速 、准确 、灵敏 程而进行远距离的传播，由于