生物无机铁磁纳米粒子酶活性能研究.pdfVIP

助 材 料 2011年第9期(42)卷 生物无机铁磁纳米粒子酶活性能研究 胡丽丽 ，马秋峰 ，解春兰 ，张玉霞 ，聂 棱 ，宋 涛 ，杨文晖 (1．中国科学院 电工研究所生物医学工程部，北京 100190；2．中国科学院 研究生院，北京 100049) 摘 要： 采用酶标分析仪，在 H。0 存在 的情况下， 2 实验方法 研 究了原核 生物趋磁细 菌天然合成 的磁性纳米颗 粒——磁小体具有内在 的类似于过氧化物酶的酶活性 2．1 实验原理 能。结果显示，随着缓冲液 的 pH 值 、反应温度 和 依据芬顿反应原理 ，当Fe 与 H o。同时存在的 H。0。浓度的增加，磁小体的所有酶活性能皆呈 “抛物 时候 ，H。o。在 Fe 的催化作用下生成具有高反应活 线”型变化，满足酶学中关于酶催化反应性能的解释。 性的羟 自由基 (·0H)，而 (·oH)可降解大多数有机 由此得 出磁 小体催化反应 的最适 PH 是 4．0值 ，最佳 物。我们知道 ，磁小体的磁核是磁铁矿晶体 ，因此其磁 温度是 30℃，最佳 H2o2浓度是 0．28mol／L。随后 ，进 核可 以等同的看作是 Fe 和 Fe”的复合物。当Fe 一 步考察 了磁 小体的酶活稳定性 。结果显示在 PH值 和 Fe什同时存在的时候 ，H O 被还原成 H O，并催化 从0．2～ 12．9变化 的不 同缓 冲液浸 泡 2h之后 的磁 小 氧化过氧化物酶底物产生相应的颜色反应。反应原理 体 的类酶活性保持在 6O 以上；从 4～97。C不 同温度 如下所示 ： 孵育磁 小体 2h，磁小体的类酶活性没有明显下降。所 (1)芬顿反应 ： 有结果表明处理之后的磁小体仍能保持优异的酶催化 Fe抖 4-H2O2—一 Fe。-4 OH ·-4 OH— 稳定性 。 Fe。-4 OH ·-4 OH一—— Fe -4 H O-4 O。 关键词 ： 磁性纳米颗粒 ；磁小体 ；类酶活性 ；趋磁细菌 (2)磁小体催化反应 ： 中图分类号 ： O441．2；Q819；Q936 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001-9731(2O11)O9—1666一O3 H，O，-4TMB 尘 2H， ()+ oxidizedTM B 1 引 言 H，O，-4 OPD ，．2H，O+ oxidizedOPD 近年来 ，磁性纳米颗粒因其特有 的机械 、电、磁 、光 H，O，-4 DAB 2H，o十 oxidizedDAB 以及化学特性在纳米医学与纳米生物技术中的应用得 2．2 实验试剂 到空前的发展 。一般而言，在磁分离和检测技术 的应 过氧化物酶底物 3355，_四甲基联苯胺 (TMB)、邻 用 中，磁性纳米粒子都被认为是生物学和化学惰性 的。 苯二胺 (OPD)以及 二氨基联苯胺 (DAB)均购 自Sig— 但是 ，最近有报道表 明Fe。0 磁性纳米粒子具有内在 ma，30 双氧水 (H O。)、无水 乙醇 (CH ())、磷酸氢 的类似于 HRP的过氧化物酶活性 ]。 二钠 (NaHPO )、磷酸二氢钾 (KH P())、柠檬 酸 尽管随着磁性纳米材料合成技术的发展，人们不