从电鳐电器官中提取N2-AchR纯品建立EAMG模型.pdfVIP

维普资讯 中国现代医药杂志2008年 7月第 J0卷第 7期 MMJC，Jul2008，Vol10，No．7 ·35 · 从电鳐电器官中提取N2-AchR纯品建立EAMG模型 杨颖 王静 王旭丹 王婉瑜 【摘要 】 目的 从厦门海域单鳍电鳐 的电器官中提取烟碱型乙酰胆碱受体 (N一AchR)纯品，用纯化的N—AchR 免疫 Lewis大 鼠 ，建立实验性 自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型。方法 参照文献报道I1_^1从电鳐 电器官提取 N一 AchR纯品，并采用 SDS凝胶电泳蛋白定性鉴定及考马斯亮兰定蛋 白含量 ；以纯提 的蛋白主动免疫 Lewis大 鼠，共免疫 3次，于末次免疫后第 3 目进行 EAMG大 鼠临床评分及攀网时间、肌 电图、血清 N一AchRab含量 、突触后膜上 N一AchR 数 目的检测。结果 纯化的蛋白含量为 1．097mg／ml(标准品为 lmg／m1)；EAMG模型组与佐剂组 比较 ，攀网时间明显降低 (P0．01)；l临床评分及肌电图第五个反应幅度衰减百分率显著升高 (P0、01)；血清 N～AchRab含量 明显增加 (P0．01)； 突触后膜上 N一AchR数 目显著减少 (P0．01)。结论 从单鳍电鳐 电器官纯提的N一AchR蛋白成功诱导 EAMG模型 ，为 进一步研究重症肌无力创造 了良好条件。 【关键词 】 实验性 自身免疫性重症肌无力 烟碱型乙酰胆碱受体 电鳐 ThemodelofEAMG wasestablished by immunization ’vitllpurified N2-AchR extractedfrom Torpedo’Selectric organ YangYing,Wangring,WangXudan，etal、BeijingArmedPolicecorpsHospital，Bejiing100027 A【bstract】 Objective Tostudytheratsmodelofexperimentalautoimmunemyastheniagravis(EAMG)established by immunization withpurled N2一AchR extracted from Torpedo’Selectricorgan．M ethods Accordingtoreferences l】-21， purifiedN2一AchR proteinwasextractedfrom electricorganoftopredo，andidentifiedwithSDSgelelectrophoresis．Lewisrats wereimmunizedwiththeproteinandcompletedFreundadjuvant(CFA)inEAMGgroup，andwithCFAaloneinCFArgoupfor threetimesingenera1．After22days，thedegreeofclinicalassessmentofrats，repetitivene~Testimulation，serum levelofanti— AchR antibody．AchR contentofthe post—synaptic membranewereobserbed．Results The contentofthe protein was 1．097mg／nll(standard：1mg／m1)．Comparedwithcontrolrats，EAMGratspresentedsomesymptomsatdifferentdegreelikeMG (P0．0J)；thepercentageofdecrementofthefifthwaveandthelevelsofAchRabwere highermarkedly (P0．01)；the numbersofAchR werelowerobviously (P0．01)．Conclusion ThemodelofEAMG establishedby immunizationwith purifiedN2一AchR extractedfromTopredo’SelectricorgancouldprovidebetterconditionofrthestudyofMG