大孔吸附树脂对桑氏链霉菌HP-47抗真菌活性物质的吸附工艺.pdfVIP

江苏农业科学 2011年第39卷第4期 一 l17一 吴浩碹 ，任大明，陈红漫，等．大孔吸附树脂对桑氏链霉菌HP一钾 抗真菌活性物质的吸附工艺[J]．江苏农业科学，2011，39(4)：117—120 大孔吸附树脂对桑 氏链霉菌 HP一47抗真菌 活性物质的吸附工艺 吴浩碹 ，任大 明，陈红漫 ，阚国仕 (沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳 110866) 摘要：对大孑L吸附树脂吸附桑氏链霉菌HP一47发酵浓缩液中抗真菌活性物质 的工艺条件进行研究。采用 5种 不同大孔吸附树脂吸附桑氏链霉菌HP一47的抗真菌活性物质，选择吸附效果最佳的树脂进行吸附条件优化。以橘 青霉为指示菌，纳他霉素为对照抗生素，采用 “管碟法”测定抗真菌活性物质含量。．结果发现 ，XAD一7树脂吸附效果 最好 ；获得其优化吸附条件：上样液pH值9，吸附流速2．5mL／min，水洗体积 180mL，洗脱流速2．5mL／min，洗脱剂为 体积分数 10％、40％、100％甲醇与水的混合物，洗脱方式为梯度洗脱。在确定的工艺条件下，XDA一7对HP一47的抗 真菌活性物质的吸附率可达92％，洗脱率可达 78％，回收率在 85％以上。 关键词：抗真菌；大孔吸附树脂；桑氏链霉菌；吸附条件 中图分类号：TS201．2 文献标志码 ：A 文章编号：1002—1302(2011)04—0117—03 大孔吸附树脂是20世纪60年代发展起来的一类具有多 缩液，置于摇床上，28℃、180r／min静态吸VFJo．5h，取出母液 孔立体结构的非离子型人工合成的有机高分子聚合物吸附 进行抗真菌物质浓度的测定 ，并分别计算其吸附效率。吸附 剂，它在抗生素分离纯化 、天然产物的分离 、中成药的制备及 效率定义为单位重量 (g)湿树脂单位时间(h)内吸附抗菌物 质量控制、色素的分离纯化 、生化药物研究、环境保护及其他 质的量 (nag)。 领域有广泛应用 。笔者所在实验室从海绵中分离得到了 1．2．1．2 不同pH值对树脂吸附能力的影响 分别称取5g 1株链霉菌HP一47，并对其 16SrRNA基因序列进行了测定， 处理好的XAD一7湿树脂 5份于 5个500mL三角瓶中，然后 经过研究鉴定该菌株为桑氏链霉菌 (Streptomycessampsonii)。 分别量取 100mL浓度为500 g／mL的发酵浓缩液 ，调pH值 研究结果表明，HP一47的发酵液中存在抗真菌活性物质。国 为 1、3、6、9(发酵液 自然pH值)和 12后加入三角瓶 中，置于 内对桑氏链霉菌活性物质的研究还较少 ，但前人的研究已经 摇床上 ，28℃、180r／min静态吸附2h后 ，取吸附母液进行抗 证明，桑氏链霉菌中确实存在具有抗菌活性的物质 。。本 真菌活性物质含量的测定。 研究以大孔吸附树脂为试验材料，探索其对桑氏链霉菌HP一 1．2．1．3 XAD一7树脂静态饱和吸附量的测定 分别称取 47摇瓶发酵产生的的抗真菌活性物质的吸附工艺，为未来生 2g处理好的 XAD一7湿树脂 于 500mL三角瓶中，再加入 100 物农药的提取分离打下一定的基础。 ． mL含抗真菌活性物质质量浓度为500 mL的lip一47 发酵产物浓缩液，置于摇床上，28℃、180r／min分别吸附0．5、 1 材料与方法 i、2、4…6812、24h，取出母液测定其残余抗真菌活性物质。 1．1 材料与药品 1．2．1．4 洗脱剂浓度 的选择 分别称取 5g处理好的 桑氏链霉菌HP一47发酵浓缩液；摇床；树脂：Amberlite XAD一7湿树脂于 l2个 500mL三角瓶中，然