AFLP技术在植物研究上的应用.pdfVIP

维普资讯 第5卷 第2期 山东商业职业技术学院学报 V01．5 No．2 JournalofShandongInstituteofC_~tlllnelceandT Jun．2OO5 2OO5年 6月 — — AFLP技术在植物研究上的应用 高 志 勇 (渭南师范学院化学化工系，陕西 渭南 714000) 摘 要： AFLP技术是一项新发展的分子标记方法，能找 出DNA分子的多态性。本文综述 了AFLP技术在植 物研究上的多方面的应用，并对其原理、存在的问题及对策进行了总结。 关键词 ： AFI~；植物 ；应用 中图分类号： Q78 文献标识码 ： A 文章编号： 1671—4385(2005)02—0088—03 AFLP TechniqueandItsAppficationsinPlantResearch GAO Zhi—yong (Department0fChertfistryandChemicalEngineering， WeinanTeachersCollege，Weinan714030，China) Abstract： Amplifiedfragmentlengthpolymorphism(AFLP)technique，anewlydevelopedmolecularmarkermeth- de ，candetectDNA polymorphism ．Itsapplicationsinplantresearchalereviewde inmanyaspects inthearticle．Andits principle ，existingproblemsandpIo1 alealsosummarized． Keywords： AFLP；plnat；印plication 引言 1 AFLP技术的优缺点 扩增性 片段 长度 多态性 (Am plfiide fragment lengthpolymorphism。A~LP)由 7~hease等 (1992)发 明 AFLP技术是一种新的分子标记方法，同RFLP 的一种将 RFLP与 PCR相结合的技术l4J。其基本原 和 RAPD等技术一样近年来应用较多。它具有以下 理是对基因组 DNA限制性酶切片段的选择性扩增 ； 的优点n]：(1)所需 DNA量少 ；(2)效率高且简单 ； 使用双链人工接头 (artificialadapter)与基 因组 DNA (3)分辨率高；(4)可靠性好。 的酶切片段相连接作为扩增反应 的模板 ，接头及与 进行 AFLP实验的步骤多，流程长 ，因而实际操 接头相邻的酶切片段的几个碱基序列作为引物的接 作 AFLP有一定难度 ]。模板 DNA的纯化 、内切酶 合点；根据基因组中被扩增DNA片段两端的序列设 的选择与完全消化、接头的连接效率、预扩增的条件 计合成相应的引物 ，引物3一端包含有选择碱基 ，其 与产物的稀释、选择性扩增时引物组合的筛选 (选择 作用是延伸酶切片段区，以保证那些能与选择碱基 碱基的数 目与组成)、引物对浓度的比例以及在现实 配对的限制性片段被扩增。扩增片段通过变性聚丙 可能的条件下检测手段的确定等一系列过程都需要 烯酰胺凝胶电泳分离检测。A