用DAPI染色法观察红鲫胚胎发育.pdfVIP

第 20卷第 4期 激 光 生 物 学 报 Vo1．20No．4 2011年 8月 ACTA LASER BIOLOGY SINICA Aug．2011 doi：10．3969／j．issn．1007—7146．2011．04．023 用 DAPI染色法观察红鲫胚胎发 育 张 纯，刘少军 (教育部蛋白质化学与鱼类发育生物学重点实验室，湖南师范大学生命科学学院，长沙410081) 摘 要 ：以红鲫为研究材料，采用DAPI荧光染料对脱膜的红鲫胚胎进行染色，在荧光体视显微镜下观察红鲫 胚胎早期卵裂到囊胚发育的过程。结果表明，该染色方法操作便捷 ，能更清晰的观察到胚胎发育的外形。值得 一 提的是 ：该方法较光学显微镜观察能清晰的观察到核DNA在细胞 中的定位 ，如囊胚期能观察到早期卵裂细胞 正进行频繁的有丝分裂等。该方法的获得为研究鱼类早期胚胎发育及相关细胞分裂特征提供了有意义的途径。 关键词 ：DAPI；胚胎发育；荧光体视显微镜 中图分类号 ：Q172 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—7146(2011)04-0553-03 TheEarly EmbryonicDevelopmentofRedCrucian CarpStainedW ith DAPI ZHANGChun，LIUShaojun (KeyLaboratoryofProteinChemistryandFishDevelopmentalBiologyofEducationofChina， CollegeofLifeSciences，HunanNormalUniversity，Changsha410081，Hunan，China) Abstract：Usingfluorescencesteredmicroscope，theearlyembryonicdevelopmentofredcruciancarpstainedwithDA— PIisdescribedinthepresentstudy．Theresultsshow thatthismethodisconvenientandcanmakethefiguresofemb~o clearer．Itisworthmentioningthatusingthismethod，thepositioningofDNA innucleicanbeobservedclearly．Forex— ample，theblastocystscellsshowingmitosisfrequentlywasobservedbythismethod．Themethodprovidesameaningful wayforthestudyofearlyemb~onicdevelopmentoffishandrelativefeatureofcelldivision． Keywords：DAPI；embryonicdevelopment；fluorescencesteredmicroscope DAPI即4’，6一二脒基一2-苯基吲哚 (4’，6-dia— DNA链上的A．T碱基对特异性结合，发射光为蓝色， midino-2一phenylindole)，是 1971年 由西 德 化学 家 由355nm激发光激发 ，发射光谱为400—500am。因 Dann等人作为一种杀锥虫药物而合成 的。三年后 ， 为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞 Williamson和Fennell首先报道把它作为 DNA荧光染 和固定细胞的染色 ，目前已被广泛的应用于 DNA分 料 ，用来观察酵母菌的线粒体 DNA 。它是一种能 子结构的动态观察 ¨J、染色体组 型研究[23、DNA定 够与DNA强力结合的荧光染料 ，可以非嵌入方式与