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第30卷 第 1期 西 华 师 范 大 学 学 报 (自然 科 学 版 ) 2009年3月 V01．3O No．1 JournalofChinaWestNormalUniversity(NaturalSciences) Mar．2009 文章编号 ：1673-5072(2009)01-0017-04 利用小麦微卫星引物建立黑麦特异标记及其局限性 田茂洁 ，唐宗祥 (1．西华师范大学生命科学学院，四川 南充 637009；2．四川农业大学植物遗传育种省级重点实验室，四川 雅安 625014) 摘 要 ：用5o对小麦SSR引物对l3种黑麦基因组DNA进行扩增，只有 Xgwm232，Xgwm260，Xgwm644这3对小 麦 SSR引物能扩增出黑麦特异的片段．这些黑麦特异片段主要集中在500bp，600bp，800bp和1000bp左右，并包含 了启动子区域．然而这 3对 SSR引物都不能从所有 13种黑麦中扩增出黑麦特异条带．这一结果表明尽管利用小麦 微卫星引物能够开发黑麦特异DNA标记，但这类标记不是对所有黑麦都适用．利用某一物种的微卫星引物开发其 近缘种属的特异 DNA标记虽然可行，但不一定具有通用性 ． 关键词：小麦；微卫星引物；黑麦；特异标记 中图分类号 ：Q34．3 文献标识码 ：A 0 前言 小麦(TriticumaestirumL．)是世界主要粮食作物之一，对小麦的改 良是解决世界粮食安全问题的重要 途径之一．挖掘小麦近缘物种的优良基因资源、有 目的地将这些有益基因导人普通小麦对于小麦改良具有重 要意义．黑麦 (Secalecereale)是小麦重要有利基因来源之一，对于丰富小麦的遗传变异，提高小麦品种的抗病 抗逆性及产量潜力具有重要作用…．然而 ，在利用黑麦改 良小麦的过程中，对导入小麦中的黑麦染色质进行 快速、准确的鉴定是必需的．目前 已运用 c一分带 】、生化标记 、分子标记 、原位杂交 等方法来分析和 鉴定小麦背景中的黑麦遗传物质．实践证明PCR分子标记具有方便快速的优点．但这类标记并不多．因此有 必要继续开发黑麦特异性的PCR分子标记．开发黑麦特异的PCR分子标记将会促进小麦育种的进程． 利用某一物种的微卫星引物开发其近缘种属的微卫星标记及物种特异分子标记是一个快捷方便的途 径．已有研究者将小麦微卫星引物应用于黑麦 】、簇毛麦 ’m】、山羊草 ¨¨，并取得 了成功．这些研究用简单 的方法增加了相关物种的微卫星引物数量．另外，通过这种方法还可以获得种属特异的分子标记 ’ ，利用 这些分子标记 ，通过简单的PCR方法就可以检测导人小麦遗传背景中的外源遗传物质．本研究利用小麦微 卫星引物，旨在筛选黑麦特异性PCR分子标记 ，为小麦背景下的黑麦成分的检测提供简便方法． 1 材料与方法 1．1 材 料 荆州黑麦 (Secalecereale．L．)，秦岭黑麦 (Secalecereale．L．)，Secalesylvestre，S．cerealeKustro，S．cereale AR106BONE5种黑麦 由四JlI农业大学植物遗传育种实验室提供，Secalevavilovii(PI618682)，Secalestrictum (PI205222)，S．cereales．sp．dighoricum (PI618668)，S． cereale s．sp．rig~lum (PI618669)，S． cereale s．sp．afghanicum (PI618662)，S．cereales．sp．ancestrale(PI283971)6种黑麦由AmericanGermplasmResources InfomrationNetwork(GRIN)提供．另两种黑麦 S．cerealeImperial，S．cerealeKingII由Dr．J．PerryGustafson (USDA-ARS，UniversityofMissouri，Columbia，MO，USA)提供．普通小麦(Triticumaestivum．L)中国春(cs) 收稿 日期 ：2008—12—10 基金项 目：国家 自然科学基金资助项 目；四川农业大学校青年基金资助项 目 作者简介：田茂洁 (1973一)，女，四川攀枝花人，西华师范大学生命科学学院副教授，硕士，主要从事植物群落学研究 1