慢性乙肝肝组织病理学与超微病理学对肝纤维化诊断意义的研究.pdfVIP

吉●H吉俅市 摹16史奎●干托t反■簏矗子学术套议 2∞8．8．15．19 (二)干扰素与细胞因子的临床应用及相关文章 慢性乙肝肝组织病理学与超微病理学对肝纤维化诊断意义的研究 肖和杰 三峡大学第三临床医学院葛洲坝中心医院感染科 目的：探讨慢性乙型肝炎患者肝组织病理学、肝内CIV免疫组化检测及病理图象定量多)新与电镜观察， 对肝纤维化诊断意义的研究． 分期(S)的诊断。2．对全部患者，进行了肝内Iv型胶原(CIV)免疫组织化学染色检测及病理图象 的定量分析。3．对所有患者的肝活检组织，进行了电镜超微病理学的系统检查。结果：1．慢性乙肝患 者，随着肝损害及纤维化程度的加重，肝内纤维组织增生呈渐进性加重。2．慢性乙肝患者，肝内CIV免 疫组化检测和病理图象定量分析结果表明：肝内CIV免疫组化检测值，能反映忠者肝内纤维化的程度， 并为血清检溅CIV及阐明忠者肝功能异常及门脉高压症等提供了病理学的依据。3．从GIS0至G4S4 期，肝组织超微病理学检查主要特征为：(1)．在肝纤维化的病程中，肝窦周HSCs增生活跃；(2)．随着 肝损害及肝纤维化程度的加重，肝细胞之间的问隙逐渐出现增宽：肝窦间隙逐渐扩大，并有基底膜样物 质的沉积；肝窦内及窦周隙胶原原纤维沉积逐渐增多，并从肝窦向肝细胞间隙扩展：肝细胞核膜出现不 规则形改变；部分病例胞质内糖原减少或消失：线粒体呈现均质化、基质变淡、线粒体嵴显示不清至消 失以及内质网扩张等改变。(3)．随着肝损害及肝纤维化程度的加重，尤其在G3S3期后，可见到肝细胞 变性及胞浆基质溶解、坏死性改变．(4)．自GISI期开始，可见部分肝细胞的胞核，发生核质溶解性坏 死的病理改变。 结论：1．慢性乙肝患者肝内CIV免疫组化检测和肝脏病理形态学ffq对照研究显示，血清C1V的检测能 够反映忠者肝内纤维化的程度及进展，为临床血清CIV的检测及肝纤维化的诊断与指导治疗提供重要的 病理学的依据。2．肝组织超微病理学研究表明，慢性乙肝忠者的肝纤维化祗肝损害的早期即已经发生． 3．通过对慢性乙肝患者肝组织病理、超微病理及肝内CIV胶原免疫组化的同步研究，为临床阐明患者为 何随肝纤维化程度的加重，而逐渐出现肝功能异常、肝衰竭及门脉高压症等一系列病理生理学改变，提 供了重要的病理学依据。 1资料与方法 1．1研究对象 104例慢性乙肝忠者，均经肝活检病理组织学确诊．忠者均为我院肝病科1994年以来收治的住院 病人。其中男性lol例，女性3例，年龄18．62岁，病程一一年伞十八年。临床诊断及血清学分型符合全 围第十次西安肝病会议修订的诊断标准(21)。伞部病例依照全同肝病病理诊断标准进行了肝组织病理 炎症分级(G)及纤维化分期(S)的诊断。 1．2研究方法 1．2．1 肝组织活检忠开入院后一心左右进行肝活检。采用Menghini型针，‘秒钟侈：速穿刺法获得肝纰 织，长度不少于+。厘米，lO％rTl醛圈定，洒精迩级脱水，二叩笨透明，石腊包埋，连续切J}约4urn，分 别作HE、MASSON(『二色改良法)，11)9状?r维十MASSON染色。 ～1S1一 吉诛耆吉俅节 摹16丧全国干扰t反知笼园子学术会议 1．2．2采集静脉血．手肝活检弱H内采取病人静脉由．5毫丹，快速分离姐清，予．2033低温保存待测。 1．2．3 肝活检组钐I超微病理学检查 对肝活检标本及时用电镜保存液保存待检。肝}n钐：超微璃理学检 查，由华中科技大学同济医学院超微病理教{{jf室协助枪查。 1．2．4肝组织病理学检查埘肝活检组织进行肝内炎症活动度分级及纤维化分期的常规病理学诊断。 1．2．5肝内IV型胶原(CIV)免疫组化检测及病理图象定量分析病理图象定挝分析，采用H本 学提供。每例病理切J|．用lO倍物镜彩色摄像输入微机，固定II!!i面。伞自动测量。每例切斤连续测定20 个肼幕，取选择血积与实际面积百分比，求出纰织切片中C1V所．圩面积百分比(17)。 1．2．6肝组织CIV免疫组织化学染色一采用链菌素亲生物蛋白过氧化物酶法(简称S-P法)。其具体方 法如下： 冲洗三次，每次3·5分钟(3x5。)．(3)．每张切片中加入一滴过氧化物酶阻断液，以阻断过氧化物酶活性， 白——过氧化物酶溶液，放置室温下10分钟。OD．PBS冲洗(3x5’)．∞．每一切片