高糖联合晚期糖基化终产物对微血管内皮细胞损伤模型的建立.pdfVIP

中国药理通讯 2009年第二十六卷第四期 行样。分别为正常组；不~HBSA的对照组；不加葡萄糖或果糖的对照组；氨基胍 (20mmol／L)阳 性对照组；槲皮素给药组 (80、40、20、10umol／L)。实验结束时 (分别为2个月或6天)，用 荧光分光光度计在ex370nm，em440nm处检测不同浓度的槲皮素对蛋白质糖基化终产物形成的抑制 作用。试验重复3次。2．不同浓度槲皮素对微血管内皮细胞的作用：在培养48ds时后，加入各浓 度槲皮素 (10、20、40、80、160 mol／L)观察24小时后，采用MTT法检测不同浓度槲皮素对血 管内皮细胞活性的作用。在570nm处测吸光度值，试验重复3次。结果：1．槲皮素对蛋 白质非酶 糖基化反应的作用：结果发现，对于分别应用葡萄糖和果糖建立的蛋白质非酶糖基化反应体系， 槲皮素均呈现出对蛋 白质非酶糖基化反应的显著抑制作用 (P0．05)，并呈一定的剂量依赖关 系。2．不同浓度槲皮素对微血管 内皮细胞的作用：通过MTT法检测发现各浓度槲皮素对微血管 内 皮细胞的活性均有抑制作用，并呈一定的剂量依赖性。结论：槲皮素对蛋 白质非酶糖基化反应的 形成有显著的抑制作用；对微血管内皮细胞的活性有显著的抑制作用 。槲皮素作为一个很有前景 的抗心血管和代谢疾病药物，其作用和机制还需全面评价及深入研究。 高糖联合晚期糖基化终产物对微血管内皮细胞损伤模型的建立 王丽 孙长凯 。郝敏 李淑媛 徐静钰 周琴 李华 大连医科大学药学院药理教研室 大连医科大学基础医学院生理教研室 大连 l16044 目的：糖尿病微血管病变是糖尿病发生最早的并发症，也是各种慢性并发症的病理基础， 成为糖尿病预后的决定性因素。晚期糖基化终产物 (advancedglycationend—products，AGEs) 对糖尿病微血管并发症的发生和发展起 了重要作用 。 本研究拟在体外培养的微血管 内皮细胞 建立规范化的AGEs损伤的细胞模型，以为进一步的药物筛选和作用机制研究奠定基础 。方法： 1．不同葡萄糖浓度对胰岛微血管内皮细胞的损伤 ：通过MTT法检测不同糖浓度 (25~55mM)对 胰岛微血管内皮细胞的损伤作用 。在570nm处测吸光度，试验重复3次。2．不同AGEs浓度对胰 岛微血管 内皮细胞的损伤 ：通过MTT法检测不同AGEs浓度 (0．125~4mg．L )对胰岛微血管 内 皮细胞的损伤作用 。在570nm处测吸光度 ，试验重复3次。3．联合高糖和AGEs对胰岛微血管内皮 细胞的损伤：通过MTT法检测正常对照组、高糖 (45mM)对照组和高糖 (45mM)联合不同AGEs 浓度 (0．25～1mg．L)对胰岛微血管内皮细胞的损伤作用 。在570nm处测吸光度，试验重复3 次。结果：1．不同葡萄浓度对胰岛微血管内皮 咆的损伤：与正常对照组相比，35mM；45raM： 55Mm葡萄糖浓度均呈现对细胞活性的抑制作}fj，jL中45mM和55Mm葡萄糖浓度组呈现显著的统计 学意义 (P0．05)，二者之间未见显著差别。2．／1同AGEs浓度对胰岛微血管 内皮细胞的损伤： 与正常对照组相比，0．5mg．L-~AGEs呈现对细胞活性的抑制作用，并有显著的统计学意义 (P 0．05)。3．联合高糖和AGEs对胰岛微血管 内皮细胞的损伤：与正常对照组相 比，45mM高糖组显 著抑制了细胞活性，结果同 “1”所述；与45mM高糖对照组相比，45mM高糖联合0．5mg．L-1AGEs 显著抑制了细胞活性 (P0．05)。结论：本研究模拟糖尿病微血管病变的临床病理生理过程 联合高糖与AGE损伤因素建立糖尿病微血管内皮细胞损伤模型，为建立规范化的糖尿病微血管 15 中国药理通讯 2009年第二十六卷第四期 内皮细胞损伤模型及药物评价系统奠定了基础。为开发安全有效的抗糖尿病及其微血管并发症 的防治药物提供了实验基础 。 牛蒡子提取物的高效液相分析及其对蛋白质非酶糖基化的作用研究 赵倩 郝敏 彭金咏。 甄宇红。 刁云鹏 。 马宏宁 陈海波 王丽 李华 大连医科大学药学院药理教研室 大连医科大学药学院药分教研室 。大连医科大学药学院药化教研室 大连医科大学中心实验室 大连 116044 目的：研究牛蒡子水提物和醇提物对蛋 白