β-巯基乙醇和bFGF分别诱导大鼠骨髓基质干细胞成神经元样细胞的生物学性状.pdfVIP

第31卷 第 1期 中山大学学报(医学科学版) Vo1．31 No．1 2010年 1月 JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2010 I3}一巯基乙醇和bFGF分别诱导大鼠骨髓基质干细胞 成神经元样细胞的生物学性状 冯 英 ，王会军 。，黄锦涛 ，谢富康 (1．中山大学中山医学院组胚教研室，广东 广州 510080；2．黄河中心医院妇产科 ，河南 郑州 450004) 摘 要： 【目的】比较p一巯基乙醇(BME)和bFGF分别诱导大鼠骨髓基质干细胞(MSC)所分化神经元样细胞的生物学 性状。 方【法】BME和bFGF分别作用于大鼠的MSC，分别于9h和5d后，进行神经元样细胞的细胞计数，然后用免疫荧 光进行神经元特异性蛋白NF200的鉴定，RT．PCR的方法分析神经元特异性基因NF的表达 ：Westernblotting对检测神经元 特异性蛋白NF200的表达。 【结果】BME诱导的细胞在加入药物 1h后形态发生改变，9h时有突起伸出，胞体变亮；bFGF 诱导的细胞在诱导后第 3天开始有突起伸出，呈神经元样，第5天突起之间相互连接 ，第 7天胞体死亡 ；而两种药物所分化 的神经元样细胞NF200的免疫荧光均成阳性．但bFGF诱导的神经元样细胞的阳性率要显著高于BME所诱导的神经元样细 胞 ；在 RT．PCR中，bFGF诱导的神经元样细胞神经元特异性基因NF200的表达要高于BME所诱导的细胞 ；westernblotting 中，bFGF诱导的神经元样细胞神经元特异性蛋白NF200的表达要高于BME所诱导的细胞。 【结论】bFGF和BME均可诱 导 MSC分化为神经元样细胞。但 bFGF所诱导的神经元样细胞在从形态上更接近于神经元 ，而神经元特异性基因NF200 mRNA及神经元特异性蛋白NF200蛋白的表达，均高于BME所诱导的细胞。 关键词 ：骨髓基质于细胞；神经元；诱导 中图分类号：R363 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2010)01—0028—05 BiologicCharacteristicStudyof13·mercaptoethanolandbFGFto InduceRatM esenchymalStem CellstoNeuron-likeCells FENGYing，WANGHui—inn，HUANGJin-tao，XIEFu—kang (1．DepartmentofHistologyandEmbryoloyg，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China； 2．DepartmentofObstetricsandGynecoloyg，CentralHospitalofYellowRiver，Zhengzhou450004，China) Absract：O【bjective】Tocomparethebiologicalcharacteristicsofneuron—likecellsfromratmesenchymalstemcells(MSC) inducedby3[-mercaptoethanol(BME)andbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)respectively．【Method】BMEnadbFGFwere addedtoratMSC respectivelyfor9hand5days．Theneuron·likecellsfrom MSCwiththeneuronspecificproteinNF200were identifiedusingimmunofluorescence．Th egeneexpressionofNFwereanalyzedusingRT—PCR andhteproteinexpressionofNF200 wereanalyzedusingWesternblotting．【Results】MSCinducedbyBMEappea