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中国水稻花药培养研究进展及其应用 孙宗修斯华敏付亚萍于永红胡国成 (中国水稻酶究所农业部水稻生物学重点实验室杭州310006) 摘要本文回顾了中国水稻花药培养30年的历史。在经历了以探索方法为主的启动阶段 以及与育种家逐步相结合的谰整阶段之后．花药培养从80年代末进入了持续发展的阶段。据统 汁。1991年以来的8年中．垒国直用花培技术选育的品种通过审定的有19个，相当于前20年审 篷品种的总和．推广面积累h。达到273：万hm2，为常规水稻、杂交水稻的品种改良作出了贡献。 奉文还介绍了近年来为完善水稻花培技术，尤其是为提高籼稻花培绿苗得率所作的研究成果， 工及花药培养与分子生物学相结合进行基因定位，与基因工程相结合加速外源基因纯合等方面 的最新进展，讨论了2l世纪水稻花药培养的发展趋势。 关麓词花药培养历史育种基因【程分子遗传学 水稻花药培养由于一次纯合，自动加倍，可以在早世代选出所期望的个体并稳定遗传。 把花药培养应用于品种改良．可以缩短育种周期，提高选择效率，节省劳力和土地。因此自 从1968年日本的新关和大野首次获得水稻花培植株后，一直受到广泛的重视。经过30年的 努力，我国的水稻花药培养奄上了与育种相结合的道路。本文简要回顾中国水稻花药培养的 简史．最新研究进展以及在育种上的应用成果。 l中国水稻花药培养简史 m国的花药培养始于1970年，至今已有30年的历史。粗略地，可以分为三个阶段。 1．1启动阶段(70年代初至舯年代初) 1970年，中国科学院的科学家开始了水稻花药培养的研究，他们的研究报告和有关的 译文使花药培养成为当时科学研究的一个热点。据估计，仅70年代末到80年代初全国参加 水稻花药培养研究的人数超过200人。 启动阶段的研究重点是探索方法，提高花培效率。当时发表了大量研究报告，适合粳稻 花培的N6培养基的提出可以认为是该阶段的标志。水稻花药培养的研究对带动其他作物的 花药培养起了积极作用。当时有一部分科研人员已注意到花培技术在水稻品种改良上的应 用，但是符合正规育种程序，通过审定的品种很少，在生产上的应用面积不大。 1．2调整阶段(踟年代中期) 在这一阶段，研究重点和研究队伍都发生了变化。从总体上说，研究人员明显减少，然 而育种家开始参与，水稻花培研究的主体由中国科学院过渡到农业科研单位。研究重点也从 提高花培效率转变为应用花培技术培育新品种。舳年代，一批粳稻品种通过正规的育种程 序而被审定。中国农业科学院作物研究所的李梅芳等成功地选育出中花系列品种(如中花8 号、中花9号等)，种植面积达30万幡，是这一阶段的标志。虽然粳稻花培开始纳入育种 程序并；筮挥作用，但中国占有重要地位的是籼稻。籼稻花药培养的绿苗率很低(平均低于 46 0．5％)并且长期得不到提高，因而尚难以把花培技术用于籼稻育种。 1．3发展阶段(舳年代末至今) 经过调整，研究队伍已基本稳定。加上90年代以来由于水稻基因组计划和转基因水稻 的崛起，使一批科研人员对水稻花培叉产生了兴趣，因此研究力量得到加强。目前的研究重 点，在应用基础方面，以提高籼稻花培效率为主，同时积极探索花培技术与基因工程相结合 的途径。在应用方面，育种家与生物技术专家更加密切的合作，使花药培养真正成为育种的 一个环节。通过审定的品种和应用面积逐年增加，其中不但有粳稻，而且有籼稻，花药培养 在杂交水稻选育中也发挥了重要作用。在这一阶段，举办了水稻花药培养的国际培训班，进 一步扩大了我国花药培养成就在世界上的影响。 2水稻花培技术的完善 在常规育种中育种家希望分离群体大些，选择的机会多些。同样，花药培养得到的绿苗 越多，从后代中选到优良基因型个体的机会也越多。因此努力提高花培绿苗得率，是实验生 物学家与育种家的共同愿望。 2．1基本探明供体对花培的影响 从事水稻花培的科研人员都知道花培效率会随季节而异，但缺少深入的了解。孙宗修等 利用人工气候箱群设计了各种光温处理，研究光温条件对籼稻花培效率的影响。结果表明， 并继而再生出许多绿苗。在短日条件下，白化苗的比例也有所下降(见表1)。这些结果为 选择合适季节进行花药培养提供了实验依据。 衰1应用花培技术选育并通过审定的部分水稻品种／杂交水稻