低温乙醇蛋白分离自控系统温度追溯性探讨.pdfVIP

·54· 低温乙醇蛋白分离自控系统温度追溯性探讨 余鼎 江砚芳左东 龙岭 成都蓉生药业有限责任公司，四川成都610041 摘要：目的 探讨低温乙醇法分离血浆蛋白的自控系统的温度追溯性。方法 采用Wet Calibration的方 Loop 式，使用线性回归法确定自控系统温度测量环路的测量不确定度。结果 自控系统温度测量环路的扩展不确定度 O．11℃。结论根据最小不确定度要求，该温度测量环路完全能满足低温乙醇法分离血浆蛋白的±O．5℃温度 控制要求。 关键词：低温乙醇法；蛋白分离；自控系统；温度追溯性 1946年Cohn等…发表了低温乙醇 Cohn6法 面我们就低温乙醇蛋白分离自控系统温度测量环路 分离白蛋白的方法，1954年Nitsehmann和Kistler又的量值溯源进行探讨。 提出了另一种改变的低温乙醇分离血浆蛋白方 l材料与方法 法【2j。作为工业化规模分离血浆蛋白的成熟工艺， 低温乙醇法至今仍然为美国大多数血液制品企业以 1．1 自控系统温度测量环路的构成低温乙醇蛋 及国内的绝大部份血液制品企业采用，如Baxter于 白分离自控系统温度测量环路由温度探头 PTl00 2006年在Los Angeles建成的FractionationComplex热电阻，美国E+H 、一体化温度变送模块 美国E 及成都蓉生药业有限责任公司于2006年建成的血+H 两部份组成，由温度探头感知温度变化获得的 液制品新车间等。低温乙醇法是以混合血浆为原 电阻信号输送至一体化温度变送模块后转换成温度 料，通过控制溶液温度、乙醇浓度、pH值、离子强度、 数据，并可以在自动控制系统的终端上显示。 蛋白浓度等5个参数，使各种蛋白在不同条件下以 1．2仪器及设备标准铂电阻温度计IRTD-400 组分的形式分布从溶液中析出，并通过离心或过滤 美国GEKaye ，测量不确定度±0．005℃，溯源至 分离出有用组份。由于合理的低温乙醇法分离血浆 美国标准与技术研究院 NIST ；标准低温油浴 蛋白的温度控制精度要求是±0．5℃。如果温度控 CTR一80 美国GEKaye ，温度不均匀性为0．0049 制不好，轻则影响回收率，重则会造成蛋白质的完全 ℃，溯源至NIsT。 变性，例如免疫球蛋白分离过程中沉淀组份Ⅱ时，当 1．3方法我们采用WetCalibration的方式， Loop 蛋白质沉淀温度高于要求1．3℃，根据实验结果，产 从设备的温度探头护套中取出温度探头，将其置于 量降低37％‘”。 标准油浴中与标准铂电阻温度计的探头处于同一高 相对于乙醇浓度、pH值、离子强度、蛋白浓度等 度。依次设定标准低温油浴的温度为一8℃、一5 4个调整到位后就不会出现变化的参数而言，溶液 ℃、一3℃、0℃和3℃，同时读取标准温度 即标准 温度由于受环境的影响是一个处于连续变化中的参 铂电阻温度计的显示的温度 xi和低温乙醇蛋白分 数。过去国内企业广泛采用了酒精温度计测量和手 离自控系统显示的温度y；，重复读取3次，根据读取 工控制温度的方式，其优点在于投资低，酒精温度计 的数据计算出回归直线．然后利用回归直线来确定 可送当地技术监督部门检定而完成温度测量的追溯 被测量的实际值，即被测量是由回归直线求出的。 即温度测量结果能够与规定的参考标准，通常是 因此被测量的不确定度就是Y对并存在回归直线 与国家测量标准或国际测量标准联系起来的特性。 即线性关系 时，通过分析回归方程Y a+bx的 也可称为溯源 ；但由于其测量的是某一个时间点 3个参数的不确定度而求出被测量髫的不 y,a和b 上的溶液温度，因此存在代表性和重复性较差、酒精 确定度。 温度计的测量精度低 酒精温度计的测量不确定度 1．4数学模型回归直线方程：y 口+bx，要求相 通常达1．0一1．5℃ 等缺点，加之手工控制的人为 影响因素多的缺点，会造成产品的质量和收率波动’ 关系数r 0．999；被测量髫的数学模型-X 气卫方 较大。通过自动化控制系统控制低温乙醇分离工艺 温度，是整个行业的发展方向，当然，温度的自动控 制需要冷媒系统、温度测量环路及温度控制逻辑 砸 c， ∞ 口 算法 的配合，需要在工厂建设初期设计并建造， 一次性投入较大，并且温度量值的溯源较为复杂，下 ·55· 直线算出的Y的值。 一÷ 一1．02。 口 2结果 4 分量标准不确定度／／, 6 S6 0．00534．按 按线性回归法可以计算出口 一0．179，6 正态分布变化属A类，自由度 13，灵敏系数c 6 0．979，r 0．9999，根据所求得的r值，看出石和Y 一譬 一2．65。 成线性关系，其回归直线 标准曲线 为Y 0．979