金龙胶囊与蛇毒对小鼠子宫颈癌(U14)抗复发与转移的观察.pdfVIP

金龙腔囊和蛇毒对小鼠子宫颈癌(u14)抗复发和转移韵观察423 金龙胶囊和蛇毒对小鼠子宫颈癌(U14)抗复发和转移的观察 刘玉琴赵雪梅顾蓓薛克勋李建生离进 金龙胶囊和蛇毒是中国癌症研究基金会北京鲜动物药研制中心李建生教授等研制的鲜动 物药制剂，经多年临床观察，对多种癌症患者均有显著的延长寿命和提高生活质量作用。在动 物实验中。对小鼠子宫颈癌和小鼠肺腺癌等多种移植瘤均有较明显的肿瘤抑制和转移抑制作 用…1，但金龙胶囊和单纯蛇毒对术后局部复发和远处转移的作用尚不清楚。我们在初步实验 的基础上【2J．进一步采用具有淋巴道和血道双向转移的小鼠子宫颈癌U14模型L3J，在小鼠的 爪垫皮下移植后，待原发瘤生长到一定大小时，手术切除原发瘤后再以金龙胶囊和蛇毒鲜动物 药制剂进行治疗，观察其对局部复发和远处转移的治疗作用。 材料与方法 1．药物①金龙胶囊：为守宫、地龙和蕲蛇等多种鲜动物提炼的制剂，呈黄色粉末状，易潮 解，每次临用前用生理盐水配成混悬液。②蛇毒：主要为银环、五步蛇等的混合蛇毒，呈黄色结 晶状，易潮解，临用前用生理盐水配成混悬液使用。上述两种制剂均由北京鲜动物药研制中心 研制并提供。 2．肿瘤模型小鼠子宫颈癌(U14)由本实验室所建，液氮冻存备用，本瘤株一般在第7天 开始转移，到11d后可达80％一100％肺和淋巴结转移，为双向高转移模型L3J。我们选用肿瘤 细胞爪垫移植模型【4J。在爪垫移植瘤细胞后第10天切除原发瘤。造成原发瘤被切除后，但体 内仍有残存的瘤细胞存在，与临床肿瘤手术切除后患者的情况相似。 3．动物本实验用近交系615小鼠，同一性别。体重为22±2 g。由中国医学科学院肿瘤 研究所购进，为二级动物(动物京第9209M19号)。 。 4．肿瘤细胞移植瘤细胞从冻存的液氮内取出，复苏后，先接种于数只615小鼠的腹腔 内，移植后7 爪垫接种(移植时避免细胞悬液外溢)。 5．手术切除原发瘤瘤细胞爪垫移植后按过去实验的结果在第10天切除原发瘤【2J。手 术时先用丝线在小腿下端原发瘤上端结扎紧，再用剪刀或手术刀从踝关节处切除整个后爪垫 (即切除原发瘤)，手术时注意避免切口处流血。 6．实验分组共进行2批实验，第一批实验在原发瘤切除后，随机分为4组，每组10～13 只小鼠。同时进行实验。①金龙胶囊组13只小鼠，原发瘤切除后当日按0．759／k【g体重开始 本课题受中国癌症研究基金会资助 作者单位：100005北京。中国医学科学院基础医学研究所(刘玉琴赵雪梅顾蓓薜克勋高进)；北京鲜 动物药研制中心(李建生) 424 中国癌症研究进展@ 给药，每天1次，每鼠每次0，3llll。经口灌胃，连续给药15d。②蛇毒组12只动物，截肢后当日 开始按100 mg／kg体重(本剂量是按探索实验结果的中剂量组剂量【21)给药，每只小鼠0．3 rnl，每天1次经口灌胃给药，连续灌胃15d。③化疗组12只小鼠，切除原发瘤后当日开始，环 切除后，每天1次灌胃0．3ml生理盐水，连续灌胃15d。第二批重复实验分组和施药方法同 第一批实验：金龙胶囊组16只小鼠；蛇毒组为15只小鼠；化疗组为11只小鼠；对照组为10只 小鼠。 7．检查指标治疗结束后，观察以下指标。 (1)局部复发瘤抑制率：各组动物同时全部处死(实验后25d，即手术后15d)，从股骨上端 切下整个左下肢称重，将荷瘤左下肢减去对侧下肢重量为瘤重，按下式计算复发瘤瘤重抑制 率[5|。 复发瘤瘤重抑制率=(1一薯蠢豢罩鸷薯萎)×100％ (2)转移抑制率：动物处死后取肺、同侧及对侧腹股沟淋巴结及同侧腋窝淋巴结。Bouin 氏液固定，石蜡包埋、切片，苏木素一伊红染色，组织学检查肺和淋巴结内的肿瘤转移情况及转 移分级[…。肺和淋巴结内转移抑制率的计算公式为： 转移抑制率=(t一碧藻嚣毳誓辜器)×100％ 结 果 1．金龙胶囊和蛇毒对局部复发瘤的抑制作用 局部复发瘤是指瘤细胞在爪垫皮下接种后 10 d，从膝关节处切除局部原发瘤后，少量残存的瘤细胞又在手术部位不