基于流动注射梯度技术微流控液滴分析系统.pdfVIP

2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议 基于流动注射梯度技术的微流控液滴分析系统 蔡龙飞 方群* 浙江大学 化学系 微分析系统研究所，杭州 310058 不同浓度液滴的形成在高通量筛选及酶动力学等研究领域有重要意义。近年来微液滴技 术在高通量筛选、单细胞分析以及酶动力学等方面有较广泛的应用。但是目前文献报道的大 多数微流控液滴系统只能形成单一浓度的液滴。能产生不同浓度梯度液滴的方法发展缓慢， 报道较少。Ismagilov研究组[1]通过控制空白缓冲液和试剂相对流速的方法来达到产生不同浓 [2] [3] 度的液滴的目的。Chiu研究组 和Huck研究组 则先应用先分裂-后合并的方法形成连续流动 的浓度梯度，再采用流动聚焦或 T形接口系统形成不同浓度的液滴。上述报道的方法只能 产生浓度范围约一个数量级的液滴，尚难以用于常规的药物筛选(通常筛选药物浓度的范围 需达 5 个数量级) 。此外,上述方法皆需连续泵入不同浓度的溶液，样品和试剂消耗量较大， 不适于应用到样品/试剂昂贵或稀少的体系。 我们提出了一种基于流动注射梯度技术的形成不同浓度液滴阵列的方法。首先利用芯片 流动注射分析系统中载流对试样区带的分散作用，在微通道内形成轴向的试样浓度梯度，再 利用流动聚焦通道分散的试样带间隔成液滴（如图 1）。采用上述系统，仅需一次注射 15 nL 样品，即可产生浓度范围达 3-4 个数量级的液滴，图 2 为单次注射 15 nL 荧光素钠溶液的荧 光信号记录图。上述特点使得系统非常适合进行高通量筛选等方面的应用。我们初步将该系 统应用于基于 β-半乳糖苷酶（β-galactosidase, β-gal ）的酶抑制分析，考察了其在高通量药物 筛选中的应用潜力。 图 1. 基于流动注射梯度技术的微流控液滴分析系统 8 y 7 t i s n 6 e t 5 n i e 4 c n e 3 c s e 2 r o u 1 l F 0 80 85 90 95 100 105 110 Time/s 图 2. 注射一次荧光素钠溶液所得到的梯度信号图. 1 2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议 参考文献 [1] H. Song, R. F. Ismagilov, Millisecond kinetics on a microfluidic chip using nanoliters of reagents, J. Am. Chem. Soc ., 2003, 125, 14613. [2] R. M. Lorenz, G. S. Fiorini, G. D. M. Jeffries, D. S. W. Lim, M. He, D. T. Chiu, Simultaneous generation of multiple aqueous droplets in a microfluidic device, Anal. Chim. Acta, 2008, 630, 124. [3] N. Damean, L. F. Olguin, F. Hollfelder, C. Abell,